农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2005年
5期
616-619
,共4页
贝为成%严琳%何启盖%肖少波%陈焕春
貝為成%嚴琳%何啟蓋%肖少波%陳煥春
패위성%엄림%하계개%초소파%진환춘
猪传染性胸膜肺炎放线杆菌%apxⅡA基因%表达%核酸疫苗%免疫应答
豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌%apxⅡA基因%錶達%覈痠疫苗%免疫應答
저전염성흉막폐염방선간균%apxⅡA기인%표체%핵산역묘%면역응답
利用PCR从自行分离鉴定的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneuromoniae,APP)血清7型菌株基因组DNA中扩增apxⅡA基因,构建了一个利用人类巨细胞病毒(Human cytomegalo virus,HCMV)启动子表达apxⅡA基因的真核表达质粒pCDapxⅡA,体外转染PK-15细胞,处理后的样品进行SDS-PAGE和Western blot分析,证实了免疫原性蛋白apxⅡA在细胞中表达.用表达质粒pCDapxⅡA作为核酸疫苗免疫BALB/c小鼠酶联免疫吸附试验,ELISA检测小鼠血清中特异性抗猪胸膜肺炎放线杆菌的抗体,结果第2次免疫后其抗体滴度都在1:128以上.初步证实,用apxⅡA作为核酸疫苗免疫动物可以激活机体产生免疫应答反应.
利用PCR從自行分離鑒定的豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌(Actinobacillus pleuropneuromoniae,APP)血清7型菌株基因組DNA中擴增apxⅡA基因,構建瞭一箇利用人類巨細胞病毒(Human cytomegalo virus,HCMV)啟動子錶達apxⅡA基因的真覈錶達質粒pCDapxⅡA,體外轉染PK-15細胞,處理後的樣品進行SDS-PAGE和Western blot分析,證實瞭免疫原性蛋白apxⅡA在細胞中錶達.用錶達質粒pCDapxⅡA作為覈痠疫苗免疫BALB/c小鼠酶聯免疫吸附試驗,ELISA檢測小鼠血清中特異性抗豬胸膜肺炎放線桿菌的抗體,結果第2次免疫後其抗體滴度都在1:128以上.初步證實,用apxⅡA作為覈痠疫苗免疫動物可以激活機體產生免疫應答反應.
이용PCR종자행분리감정적저전염성흉막폐염방선간균(Actinobacillus pleuropneuromoniae,APP)혈청7형균주기인조DNA중확증apxⅡA기인,구건료일개이용인류거세포병독(Human cytomegalo virus,HCMV)계동자표체apxⅡA기인적진핵표체질립pCDapxⅡA,체외전염PK-15세포,처리후적양품진행SDS-PAGE화Western blot분석,증실료면역원성단백apxⅡA재세포중표체.용표체질립pCDapxⅡA작위핵산역묘면역BALB/c소서매련면역흡부시험,ELISA검측소서혈청중특이성항저흉막폐염방선간균적항체,결과제2차면역후기항체적도도재1:128이상.초보증실,용apxⅡA작위핵산역묘면역동물가이격활궤체산생면역응답반응.
