CAJ | 학술논문

目的:观察不同剂量雌激素,卵泡雌激素及黄体生成素对大鼠成骨细胞雌激素受体β表达的影响.方法:实验于2004-02/08在哈尔滨医科大学第二临床医学院科研中心完成.①取三四个月龄雌性Wistar大鼠28只用于大鼠成骨细胞体外培养.采用二次酶消化、反复贴壁法分离纯化培养大鼠成骨细胞.观察其形态、改良钙钴法碱性磷酸酶染色,培养上清碱性磷酸酶、骨钙素测定来鉴定成骨细胞.②取2代培养的成骨细胞用无血清培养基培养24 h,分为10组:对照组,1×10-10,1×10-8,1×10-6mol/L 17β-雌二醇组,10,100,1000 U/L黄体生成素组,1×10-7,1×10-6,1×10-5g/L卵泡刺激素组.每组3个孔.对照组加入基础培养基,其他各组分别加入相应终浓度药物,培养24～48 h.大鼠成骨细胞雌激素受体表达阳性细胞数检测应用免疫组织化学法测定,以细胞浆有棕黄色颗粒沉积为阳性.成骨细胞雌激素受体β表达检测应用半定量免疫印渍酶促底物染色法以及化学发光法,以A值越高,说明雌激素受体β表达越多.结果:①成骨细胞形态及特征性鉴定:成骨细胞随培养时间的延长,细胞呈指数增长,分泌碱性磷酸酶和骨钙素,碱性磷酸酶染色阳性率为90%,表现出旺盛的分泌功能.②成骨细胞雌激素受体表达阳性细胞数检测结果:不同剂量卵泡刺激素组和黄体生成素组对雌激素受体表达无明显影响;雌激素1×10-8mol/L组和1×10-6mol/L组显著高于对照组[(90.95±5.89),(95.12±6.17),(81.44±5.37)个数/100个细胞,t=2.95,P＜0.05;t=3.50,P＜0.01].③成骨细胞雌激素受体β表达结果:不同剂量卵泡刺激素及黄体生成素对雌激素受体β的表达无明显影响;随雌激素浓度的增加成骨细胞雌激素受体β表达呈上升趋势.结论:雌激素能促进成骨细胞雌激素受体β的表达,且表现出剂量依赖性.而黄体生成素、卵泡刺激素对雌激素受体β表达无直接影响. 目的:觀察不同劑量雌激素,卵泡雌激素及黃體生成素對大鼠成骨細胞雌激素受體β錶達的影響.方法:實驗于2004-02/08在哈爾濱醫科大學第二臨床醫學院科研中心完成.①取三四箇月齡雌性Wistar大鼠28隻用于大鼠成骨細胞體外培養.採用二次酶消化、反複貼壁法分離純化培養大鼠成骨細胞.觀察其形態、改良鈣鈷法堿性燐痠酶染色,培養上清堿性燐痠酶、骨鈣素測定來鑒定成骨細胞.②取2代培養的成骨細胞用無血清培養基培養24 h,分為10組:對照組,1×10-10,1×10-8,1×10-6mol/L 17β-雌二醇組,10,100,1000 U/L黃體生成素組,1×10-7,1×10-6,1×10-5g/L卵泡刺激素組.每組3箇孔.對照組加入基礎培養基,其他各組分彆加入相應終濃度藥物,培養24～48 h.大鼠成骨細胞雌激素受體錶達暘性細胞數檢測應用免疫組織化學法測定,以細胞漿有棕黃色顆粒沉積為暘性.成骨細胞雌激素受體β錶達檢測應用半定量免疫印漬酶促底物染色法以及化學髮光法,以A值越高,說明雌激素受體β錶達越多.結果:①成骨細胞形態及特徵性鑒定:成骨細胞隨培養時間的延長,細胞呈指數增長,分泌堿性燐痠酶和骨鈣素,堿性燐痠酶染色暘性率為90%,錶現齣旺盛的分泌功能.②成骨細胞雌激素受體錶達暘性細胞數檢測結果:不同劑量卵泡刺激素組和黃體生成素組對雌激素受體錶達無明顯影響;雌激素1×10-8mol/L組和1×10-6mol/L組顯著高于對照組[(90.95±5.89),(95.12±6.17),(81.44±5.37)箇數/100箇細胞,t=2.95,P＜0.05;t=3.50,P＜0.01].③成骨細胞雌激素受體β錶達結果:不同劑量卵泡刺激素及黃體生成素對雌激素受體β的錶達無明顯影響;隨雌激素濃度的增加成骨細胞雌激素受體β錶達呈上升趨勢.結論:雌激素能促進成骨細胞雌激素受體β的錶達,且錶現齣劑量依賴性.而黃體生成素、卵泡刺激素對雌激素受體β錶達無直接影響.
목적:관찰불동제량자격소,란포자격소급황체생성소대대서성골세포자격소수체β표체적영향.방법:실험우2004-02/08재합이빈의과대학제이림상의학원과연중심완성.①취삼사개월령자성Wistar대서28지용우대서성골세포체외배양.채용이차매소화、반복첩벽법분리순화배양대서성골세포.관찰기형태、개량개고법감성린산매염색,배양상청감성린산매、골개소측정래감정성골세포.②취2대배양적성골세포용무혈청배양기배양24 h,분위10조:대조조,1×10-10,1×10-8,1×10-6mol/L 17β-자이순조,10,100,1000 U/L황체생성소조,1×10-7,1×10-6,1×10-5g/L란포자격소조.매조3개공.대조조가입기출배양기,기타각조분별가입상응종농도약물,배양24～48 h.대서성골세포자격소수체표체양성세포수검측응용면역조직화학법측정,이세포장유종황색과립침적위양성.성골세포자격소수체β표체검측응용반정량면역인지매촉저물염색법이급화학발광법,이A치월고,설명자격소수체β표체월다.결과:①성골세포형태급특정성감정:성골세포수배양시간적연장,세포정지수증장,분비감성린산매화골개소,감성린산매염색양성솔위90%,표현출왕성적분비공능.②성골세포자격소수체표체양성세포수검측결과:불동제량란포자격소조화황체생성소조대자격소수체표체무명현영향;자격소1×10-8mol/L조화1×10-6mol/L조현저고우대조조[(90.95±5.89),(95.12±6.17),(81.44±5.37)개수/100개세포,t=2.95,P＜0.05;t=3.50,P＜0.01].③성골세포자격소수체β표체결과:불동제량란포자격소급황체생성소대자격소수체β적표체무명현영향;수자격소농도적증가성골세포자격소수체β표체정상승추세.결론:자격소능촉진성골세포자격소수체β적표체,차표현출제량의뢰성.이황체생성소、란포자격소대자격소수체β표체무직접영향.