中国临床康复
中國臨床康複
중국림상강복
CHINESE JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATION
2006年
45期
94-96
,共3页
转化生长因子β%结缔组织%成骨细胞
轉化生長因子β%結締組織%成骨細胞
전화생장인자β%결체조직%성골세포
目的:观察转化生长因子β对体外培养人成骨细胞结缔组织生长因子mRNA表达的影响.方法:实验在青岛海慈医疗集团检验科完成.选择2005-02/03在青岛海慈医疗集团骨科住院的无其他疾患的骨折患者3例,年龄30～50岁,经患者知情同意后,取其髂骨松质骨,剪碎,Ⅳ型胶原酶消化后,将骨片贴于25 cm2培养瓶,加入MEM培养液约15 d后,可见细胞游出,约25 d达汇片,胰酶消化,按1×106个细胞接种培养后第2天,换含1 g/L BSA MEM培养液继续培养24 h后,加入10 ng/L转化生长因子β干预培养0,3,6,12,24 h,或在转化生长因子β作用峰值时,分别给予不同浓度(0,5,10,25 ng/L)干预,抽提总RNA,采用半定量反转录-聚合酶链反应和Northern blot法检测干预后成骨细胞结缔组织生长因子mRNA表达水平.结果:①半定量反转录-聚合酶链反应检测转化生长因子β对体外培养成骨细胞结缔组织生长因子mRNA表达的影响:与0 ng/L对照组相比,5,10和25 ng/L转化生长因子β干预后结缔组织生长因子mRNA表达水平显著升高(P＜0.01),呈明显剂量依赖关系;10 ng/L转化生长因子β干预6 h时转化生长因子β上调作用达高峰(P＜0.01),然后下降,至24 h时转化生长因子β对结缔组织生长因子的上调作用基本消失(P＞0.05).②Northern blot法检测转化生长因子β对体外培养成骨细胞结缔组织生长因子mRNA表达的影响:与0 ng/L对照组相比,10和25 ng/L转化生长因子β干预后结缔组织生长因子mRNA表达水平显著升高(P＜0.01),但无明显剂量依赖关系(P＞0.05);10 ng/L转化生长因子β干预6 h时转化生长因子β上调作用达高峰(P＜0.01),然后下降,至24 h时转化生长因子β对结缔组织生长因子的上调作用基本消失(P＞0.05).结论:转化生长因子β可呈剂量依赖性上调人成骨细胞结缔组织生长因子mRNA的表达.
目的:觀察轉化生長因子β對體外培養人成骨細胞結締組織生長因子mRNA錶達的影響.方法:實驗在青島海慈醫療集糰檢驗科完成.選擇2005-02/03在青島海慈醫療集糰骨科住院的無其他疾患的骨摺患者3例,年齡30～50歲,經患者知情同意後,取其髂骨鬆質骨,剪碎,Ⅳ型膠原酶消化後,將骨片貼于25 cm2培養瓶,加入MEM培養液約15 d後,可見細胞遊齣,約25 d達彙片,胰酶消化,按1×106箇細胞接種培養後第2天,換含1 g/L BSA MEM培養液繼續培養24 h後,加入10 ng/L轉化生長因子β榦預培養0,3,6,12,24 h,或在轉化生長因子β作用峰值時,分彆給予不同濃度(0,5,10,25 ng/L)榦預,抽提總RNA,採用半定量反轉錄-聚閤酶鏈反應和Northern blot法檢測榦預後成骨細胞結締組織生長因子mRNA錶達水平.結果:①半定量反轉錄-聚閤酶鏈反應檢測轉化生長因子β對體外培養成骨細胞結締組織生長因子mRNA錶達的影響:與0 ng/L對照組相比,5,10和25 ng/L轉化生長因子β榦預後結締組織生長因子mRNA錶達水平顯著升高(P＜0.01),呈明顯劑量依賴關繫;10 ng/L轉化生長因子β榦預6 h時轉化生長因子β上調作用達高峰(P＜0.01),然後下降,至24 h時轉化生長因子β對結締組織生長因子的上調作用基本消失(P＞0.05).②Northern blot法檢測轉化生長因子β對體外培養成骨細胞結締組織生長因子mRNA錶達的影響:與0 ng/L對照組相比,10和25 ng/L轉化生長因子β榦預後結締組織生長因子mRNA錶達水平顯著升高(P＜0.01),但無明顯劑量依賴關繫(P＞0.05);10 ng/L轉化生長因子β榦預6 h時轉化生長因子β上調作用達高峰(P＜0.01),然後下降,至24 h時轉化生長因子β對結締組織生長因子的上調作用基本消失(P＞0.05).結論:轉化生長因子β可呈劑量依賴性上調人成骨細胞結締組織生長因子mRNA的錶達.
목적:관찰전화생장인자β대체외배양인성골세포결체조직생장인자mRNA표체적영향.방법:실험재청도해자의료집단검험과완성.선택2005-02/03재청도해자의료집단골과주원적무기타질환적골절환자3례,년령30～50세,경환자지정동의후,취기가골송질골,전쇄,Ⅳ형효원매소화후,장골편첩우25 cm2배양병,가입MEM배양액약15 d후,가견세포유출,약25 d체회편,이매소화,안1×106개세포접충배양후제2천,환함1 g/L BSA MEM배양액계속배양24 h후,가입10 ng/L전화생장인자β간예배양0,3,6,12,24 h,혹재전화생장인자β작용봉치시,분별급여불동농도(0,5,10,25 ng/L)간예,추제총RNA,채용반정량반전록-취합매련반응화Northern blot법검측간예후성골세포결체조직생장인자mRNA표체수평.결과:①반정량반전록-취합매련반응검측전화생장인자β대체외배양성골세포결체조직생장인자mRNA표체적영향:여0 ng/L대조조상비,5,10화25 ng/L전화생장인자β간예후결체조직생장인자mRNA표체수평현저승고(P＜0.01),정명현제량의뢰관계;10 ng/L전화생장인자β간예6 h시전화생장인자β상조작용체고봉(P＜0.01),연후하강,지24 h시전화생장인자β대결체조직생장인자적상조작용기본소실(P＞0.05).②Northern blot법검측전화생장인자β대체외배양성골세포결체조직생장인자mRNA표체적영향:여0 ng/L대조조상비,10화25 ng/L전화생장인자β간예후결체조직생장인자mRNA표체수평현저승고(P＜0.01),단무명현제량의뢰관계(P＞0.05);10 ng/L전화생장인자β간예6 h시전화생장인자β상조작용체고봉(P＜0.01),연후하강,지24 h시전화생장인자β대결체조직생장인자적상조작용기본소실(P＞0.05).결론:전화생장인자β가정제량의뢰성상조인성골세포결체조직생장인자mRNA적표체.
