遗传
遺傳
유전
HEREDITAS(BEIJING)
2007年
5期
637-642
,共6页
张红梅%戴星%孟继鸿%赵宇%单祥年
張紅梅%戴星%孟繼鴻%趙宇%單祥年
장홍매%대성%맹계홍%조우%단상년
戊型肝炎病毒%单克隆抗体%基因型%表位
戊型肝炎病毒%單剋隆抗體%基因型%錶位
무형간염병독%단극륭항체%기인형%표위
以戊型肝炎病毒(HEV)第4基因型中国株ORF2编码蛋白p166Chn制备单克隆抗体(McAbs),同时制备20个N端或C端逐渐截短的p166Chn截短蛋白,与7种不同基因型和亚型的p166蛋白一起,通过ELISA、免疫印迹(Western blot)以及竞争抑制实验对主要存在于我国的HEV第4基因型毒株进行抗原表位分析.结果发现所制备的McAbs与p166Chn截短蛋白的免疫反应有两种类型,以1G10为代表的McAbs能与N端不短于aa477、C端不短于aa613的截短蛋白反应,其针对的抗原表位是构象依赖型表位,依赖于aa477～aa613肽链区段;而McAb 2F11则能与N端不短于aa474、C端不短于aa617的截短蛋白反应,其针对的抗原表位也是构象表位,但需依赖于较长的肽链区段(aa474～aa617).竞争抑制实验显示两类McAbs互不抑制,进一步证实了所发现的两个抗原表位在空间位置上的不同.更有意义的是,两类McAbs均能与其他不同HEV基因型和亚型来源的p166重组蛋白发生阳性反应,表明这两个抗原表位是HEV基因型共同性的,可以在世界各国分布的不同基因型HEV毒株中诱导交叉免疫.
以戊型肝炎病毒(HEV)第4基因型中國株ORF2編碼蛋白p166Chn製備單剋隆抗體(McAbs),同時製備20箇N耑或C耑逐漸截短的p166Chn截短蛋白,與7種不同基因型和亞型的p166蛋白一起,通過ELISA、免疫印跡(Western blot)以及競爭抑製實驗對主要存在于我國的HEV第4基因型毒株進行抗原錶位分析.結果髮現所製備的McAbs與p166Chn截短蛋白的免疫反應有兩種類型,以1G10為代錶的McAbs能與N耑不短于aa477、C耑不短于aa613的截短蛋白反應,其針對的抗原錶位是構象依賴型錶位,依賴于aa477～aa613肽鏈區段;而McAb 2F11則能與N耑不短于aa474、C耑不短于aa617的截短蛋白反應,其針對的抗原錶位也是構象錶位,但需依賴于較長的肽鏈區段(aa474～aa617).競爭抑製實驗顯示兩類McAbs互不抑製,進一步證實瞭所髮現的兩箇抗原錶位在空間位置上的不同.更有意義的是,兩類McAbs均能與其他不同HEV基因型和亞型來源的p166重組蛋白髮生暘性反應,錶明這兩箇抗原錶位是HEV基因型共同性的,可以在世界各國分佈的不同基因型HEV毒株中誘導交扠免疫.
이무형간염병독(HEV)제4기인형중국주ORF2편마단백p166Chn제비단극륭항체(McAbs),동시제비20개N단혹C단축점절단적p166Chn절단단백,여7충불동기인형화아형적p166단백일기,통과ELISA、면역인적(Western blot)이급경쟁억제실험대주요존재우아국적HEV제4기인형독주진행항원표위분석.결과발현소제비적McAbs여p166Chn절단단백적면역반응유량충류형,이1G10위대표적McAbs능여N단불단우aa477、C단불단우aa613적절단단백반응,기침대적항원표위시구상의뢰형표위,의뢰우aa477～aa613태련구단;이McAb 2F11칙능여N단불단우aa474、C단불단우aa617적절단단백반응,기침대적항원표위야시구상표위,단수의뢰우교장적태련구단(aa474～aa617).경쟁억제실험현시량류McAbs호불억제,진일보증실료소발현적량개항원표위재공간위치상적불동.경유의의적시,량류McAbs균능여기타불동HEV기인형화아형래원적p166중조단백발생양성반응,표명저량개항원표위시HEV기인형공동성적,가이재세계각국분포적불동기인형HEV독주중유도교차면역.
