肝胆胰外科杂志
肝膽胰外科雜誌
간담이외과잡지
JOURNAL OF HEPATOPANCREATOBILIARY SURGERY
2009年
4期
288-291
,共4页
董朝富%周安立%陈刚%朱智%颜廷启%刘顺方%刘锋%沈文状%杨志芳%易继林
董朝富%週安立%陳剛%硃智%顏廷啟%劉順方%劉鋒%瀋文狀%楊誌芳%易繼林
동조부%주안립%진강%주지%안정계%류순방%류봉%침문상%양지방%역계림
Rac1%癌,肝细胞%逆转录病毒载体%侵袭
Rac1%癌,肝細胞%逆轉錄病毒載體%侵襲
Rac1%암,간세포%역전록병독재체%침습
目的 探讨抑制人肝癌细胞HepG2中Rac1的活性对其生长及侵袭能力的影响.方法 应用逆转录病毒载体,将Rac1基因的阴性突变体Rac1N17导入HepG2细胞,经嘌呤霉素筛选后获得表达Rac1N17的阳性细胞克隆Rac1N17-HepG2,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达,四甲基偶氮唑(MTT)法检测细胞增殖抑制并绘制细胞生长曲线,细胞基质黏附实验检测对细胞的黏附能力的影响,Transwell法检测细胞侵袭能力的改变.结果 荧光镜下可见绿色荧光蛋白主要分布于HepG2细胞核中,在细胞质中也有少量表达,证实了病毒栽体质粒转染成功.MTT法表明Rac1的活性抑制后,HepG2细胞的增殖能力无明显变化(P>0.05);细胞基质黏附实验显示HepG2细胞与基质的黏附能力随着时间的延长而逐渐减弱(P<0.05);Transwell侵袭实验结果 显示Rac1的活性抑制后,Rac1抑制组穿过PET滤膜的HepG2细胞数明显少于对照组(P<0.05),表明其侵袭能力明显受抑制.结论 Rac1基因在肝癌细胞的黏附、侵袭及过程中发挥重要的作用,有望成为肝细胞癌基因治疗新的靶点.
目的 探討抑製人肝癌細胞HepG2中Rac1的活性對其生長及侵襲能力的影響.方法 應用逆轉錄病毒載體,將Rac1基因的陰性突變體Rac1N17導入HepG2細胞,經嘌呤黴素篩選後穫得錶達Rac1N17的暘性細胞剋隆Rac1N17-HepG2,熒光顯微鏡下觀察綠色熒光蛋白的錶達,四甲基偶氮唑(MTT)法檢測細胞增殖抑製併繪製細胞生長麯線,細胞基質黏附實驗檢測對細胞的黏附能力的影響,Transwell法檢測細胞侵襲能力的改變.結果 熒光鏡下可見綠色熒光蛋白主要分佈于HepG2細胞覈中,在細胞質中也有少量錶達,證實瞭病毒栽體質粒轉染成功.MTT法錶明Rac1的活性抑製後,HepG2細胞的增殖能力無明顯變化(P>0.05);細胞基質黏附實驗顯示HepG2細胞與基質的黏附能力隨著時間的延長而逐漸減弱(P<0.05);Transwell侵襲實驗結果 顯示Rac1的活性抑製後,Rac1抑製組穿過PET濾膜的HepG2細胞數明顯少于對照組(P<0.05),錶明其侵襲能力明顯受抑製.結論 Rac1基因在肝癌細胞的黏附、侵襲及過程中髮揮重要的作用,有望成為肝細胞癌基因治療新的靶點.
목적 탐토억제인간암세포HepG2중Rac1적활성대기생장급침습능력적영향.방법 응용역전록병독재체,장Rac1기인적음성돌변체Rac1N17도입HepG2세포,경표령매소사선후획득표체Rac1N17적양성세포극륭Rac1N17-HepG2,형광현미경하관찰록색형광단백적표체,사갑기우담서(MTT)법검측세포증식억제병회제세포생장곡선,세포기질점부실험검측대세포적점부능력적영향,Transwell법검측세포침습능력적개변.결과 형광경하가견록색형광단백주요분포우HepG2세포핵중,재세포질중야유소량표체,증실료병독재체질립전염성공.MTT법표명Rac1적활성억제후,HepG2세포적증식능력무명현변화(P>0.05);세포기질점부실험현시HepG2세포여기질적점부능력수착시간적연장이축점감약(P<0.05);Transwell침습실험결과 현시Rac1적활성억제후,Rac1억제조천과PET려막적HepG2세포수명현소우대조조(P<0.05),표명기침습능력명현수억제.결론 Rac1기인재간암세포적점부、침습급과정중발휘중요적작용,유망성위간세포암기인치료신적파점.
