山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2010年
27期
8-10
,共3页
流感病毒%板蓝根%核蛋白%转染
流感病毒%闆藍根%覈蛋白%轉染
류감병독%판람근%핵단백%전염
目的 探讨不同板蓝根制剂对甲型流感病毒核蛋白(NP)的作用,寻找抗流感病毒中药的有效成分.方法 采用传统水煮浸法提取的板蓝根水煎液和有机溶剂浸泡法提取的板蓝根凝集素及购买的板蓝根注射液,用细胞病变效应(CPE)法测得三种制剂试验浓度分别为1.95、2.60、0.78 mg/ml.将培养的Hela细胞分为八组,质粒组转染pcDNA3.1(+)/NP,空质粒组转染pcDNA3.1(+);注射液、水煎液、凝集素实验组则将板蓝根注射液、水煎液、凝集素的试验浓度分别作用于转染重组质粒pcDNA3.1(+)/NP的Hela细胞,三种制剂对应的对照组不进行转染,仅将对应制剂作用于Hela细胞.用胶体金免疫层析法和间接免疫荧光法检测各组NP表达.结果 质粒组、注射液及水煎液实验组胶体金试验阳性,免疫荧光法证实作用转染的Hela细胞仍发出较强绿色荧光,且表达的NP定位于细胞质中;而凝集素组及空质粒组中表达NP的细胞未出现较强的绿色荧光且胶体金试验阴性.结论 板蓝根凝集素可抑制NP基因表达,此为研发抗流感病毒的药物提供了新思路.
目的 探討不同闆藍根製劑對甲型流感病毒覈蛋白(NP)的作用,尋找抗流感病毒中藥的有效成分.方法 採用傳統水煮浸法提取的闆藍根水煎液和有機溶劑浸泡法提取的闆藍根凝集素及購買的闆藍根註射液,用細胞病變效應(CPE)法測得三種製劑試驗濃度分彆為1.95、2.60、0.78 mg/ml.將培養的Hela細胞分為八組,質粒組轉染pcDNA3.1(+)/NP,空質粒組轉染pcDNA3.1(+);註射液、水煎液、凝集素實驗組則將闆藍根註射液、水煎液、凝集素的試驗濃度分彆作用于轉染重組質粒pcDNA3.1(+)/NP的Hela細胞,三種製劑對應的對照組不進行轉染,僅將對應製劑作用于Hela細胞.用膠體金免疫層析法和間接免疫熒光法檢測各組NP錶達.結果 質粒組、註射液及水煎液實驗組膠體金試驗暘性,免疫熒光法證實作用轉染的Hela細胞仍髮齣較彊綠色熒光,且錶達的NP定位于細胞質中;而凝集素組及空質粒組中錶達NP的細胞未齣現較彊的綠色熒光且膠體金試驗陰性.結論 闆藍根凝集素可抑製NP基因錶達,此為研髮抗流感病毒的藥物提供瞭新思路.
목적 탐토불동판람근제제대갑형류감병독핵단백(NP)적작용,심조항류감병독중약적유효성분.방법 채용전통수자침법제취적판람근수전액화유궤용제침포법제취적판람근응집소급구매적판람근주사액,용세포병변효응(CPE)법측득삼충제제시험농도분별위1.95、2.60、0.78 mg/ml.장배양적Hela세포분위팔조,질립조전염pcDNA3.1(+)/NP,공질립조전염pcDNA3.1(+);주사액、수전액、응집소실험조칙장판람근주사액、수전액、응집소적시험농도분별작용우전염중조질립pcDNA3.1(+)/NP적Hela세포,삼충제제대응적대조조불진행전염,부장대응제제작용우Hela세포.용효체금면역층석법화간접면역형광법검측각조NP표체.결과 질립조、주사액급수전액실험조효체금시험양성,면역형광법증실작용전염적Hela세포잉발출교강록색형광,차표체적NP정위우세포질중;이응집소조급공질립조중표체NP적세포미출현교강적록색형광차효체금시험음성.결론 판람근응집소가억제NP기인표체,차위연발항류감병독적약물제공료신사로.
