中外医学研究
中外醫學研究
중외의학연구
CHINESE AND FOREIGN MEDICAL RESEARCH
2010年
14期
21-23
,共3页
青蒿%基因克隆%酵母%载体构建
青蒿%基因剋隆%酵母%載體構建
청호%기인극륭%효모%재체구건
目的 构建青蒿细胞色素P450单加氧酶(CYP71AV1)和青蒿醛△11(13)双键还原酶(DBR2)基因酵母表达载体,为在微生物体内重建青蒿素合成途径打下基础.方法 采用PCR扩增、片段连接表达载体、转化大肠杆菌、双酶切和序列分析鉴定重组子,并将CYP71AV1-DBR2双基因表达载体导入酵母菌中.结果 分别获得1488 bp的CYP71AV1基因和1246 bp的DBR2基因,构建了重组子pESC-CYP-DBR2,测序结果与GenBank上已登录的相应基因序列吻合,将其导入酵母菌后,已检测到它们的表达.结论 成功构建了青蒿素前体合成基因的酵母表达载体,为下一步培育青蒿素全合成酵母工程菌打下了基础.
目的 構建青蒿細胞色素P450單加氧酶(CYP71AV1)和青蒿醛△11(13)雙鍵還原酶(DBR2)基因酵母錶達載體,為在微生物體內重建青蒿素閤成途徑打下基礎.方法 採用PCR擴增、片段連接錶達載體、轉化大腸桿菌、雙酶切和序列分析鑒定重組子,併將CYP71AV1-DBR2雙基因錶達載體導入酵母菌中.結果 分彆穫得1488 bp的CYP71AV1基因和1246 bp的DBR2基因,構建瞭重組子pESC-CYP-DBR2,測序結果與GenBank上已登錄的相應基因序列吻閤,將其導入酵母菌後,已檢測到它們的錶達.結論 成功構建瞭青蒿素前體閤成基因的酵母錶達載體,為下一步培育青蒿素全閤成酵母工程菌打下瞭基礎.
목적 구건청호세포색소P450단가양매(CYP71AV1)화청호철△11(13)쌍건환원매(DBR2)기인효모표체재체,위재미생물체내중건청호소합성도경타하기출.방법 채용PCR확증、편단련접표체재체、전화대장간균、쌍매절화서렬분석감정중조자,병장CYP71AV1-DBR2쌍기인표체재체도입효모균중.결과 분별획득1488 bp적CYP71AV1기인화1246 bp적DBR2기인,구건료중조자pESC-CYP-DBR2,측서결과여GenBank상이등록적상응기인서렬문합,장기도입효모균후,이검측도타문적표체.결론 성공구건료청호소전체합성기인적효모표체재체,위하일보배육청호소전합성효모공정균타하료기출.
