上海交通大学学报（医学版）
上海交通大學學報（醫學版）
상해교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)
2011年
4期
397-400
,共4页
钟甜%尤列·皮尔曼%维克多·科罗索夫%周向东
鐘甜%尤列·皮爾曼%維剋多·科囉索伕%週嚮東
종첨%우렬·피이만%유극다·과라색부%주향동
机械牵张%游离钙离子%丝裂素活化蛋白激酶%黏蛋白5AC
機械牽張%遊離鈣離子%絲裂素活化蛋白激酶%黏蛋白5AC
궤계견장%유리개리자%사렬소활화단백격매%점단백5AC
目的 观察机械牵张对人气道黏膜上皮细胞黏蛋白(MUC)表达的影响,并对其信号转导机制进行初步探讨.方法 采用多功能小型生物撞击机构建体外培养的人气道黏膜上皮细胞牵张模型,分别给予丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的三条主要通路抑制剂:JNK抑制剂(SP600125)、p38蛋白激酶抑制剂(SB203580)及ERK1/2抑制剂(U0126)(浓度均为30μmol/L),并设未进行机械牵张的对照组和单纯机械牵张组.采用流式细胞仪检测牵张前后胞内游离Ca<'2+>荧光强度的变化,激光共聚焦显微镜观察胞内游离Ca<'2+>"的分布情况,并分别采用RT-PCR和ELISA方法 检测MUC5AC mRNA表达和蛋白分泌量.结果 牵张能显著升高人气道黏膜上皮细胞胞内ca<'2+>浓度、MUC5AC mRNA和蛋白表达(均P<0.01).U0126和SB203580能抑制牵张所致MUC5AC mRNA和蛋白表达增加(均P<0.01).结论 机械牵张能升高人气道黏膜上皮细胞黏蛋白表达,其机制可能与胞内Ca<'2+>浓度的升高以及ERK1/2、p38 MAPK信号通路有关.
目的 觀察機械牽張對人氣道黏膜上皮細胞黏蛋白(MUC)錶達的影響,併對其信號轉導機製進行初步探討.方法 採用多功能小型生物撞擊機構建體外培養的人氣道黏膜上皮細胞牽張模型,分彆給予絲裂素活化蛋白激酶(MAPK)信號通路的三條主要通路抑製劑:JNK抑製劑(SP600125)、p38蛋白激酶抑製劑(SB203580)及ERK1/2抑製劑(U0126)(濃度均為30μmol/L),併設未進行機械牽張的對照組和單純機械牽張組.採用流式細胞儀檢測牽張前後胞內遊離Ca<'2+>熒光彊度的變化,激光共聚焦顯微鏡觀察胞內遊離Ca<'2+>"的分佈情況,併分彆採用RT-PCR和ELISA方法 檢測MUC5AC mRNA錶達和蛋白分泌量.結果 牽張能顯著升高人氣道黏膜上皮細胞胞內ca<'2+>濃度、MUC5AC mRNA和蛋白錶達(均P<0.01).U0126和SB203580能抑製牽張所緻MUC5AC mRNA和蛋白錶達增加(均P<0.01).結論 機械牽張能升高人氣道黏膜上皮細胞黏蛋白錶達,其機製可能與胞內Ca<'2+>濃度的升高以及ERK1/2、p38 MAPK信號通路有關.
목적 관찰궤계견장대인기도점막상피세포점단백(MUC)표체적영향,병대기신호전도궤제진행초보탐토.방법 채용다공능소형생물당격궤구건체외배양적인기도점막상피세포견장모형,분별급여사렬소활화단백격매(MAPK)신호통로적삼조주요통로억제제:JNK억제제(SP600125)、p38단백격매억제제(SB203580)급ERK1/2억제제(U0126)(농도균위30μmol/L),병설미진행궤계견장적대조조화단순궤계견장조.채용류식세포의검측견장전후포내유리Ca<'2+>형광강도적변화,격광공취초현미경관찰포내유리Ca<'2+>"적분포정황,병분별채용RT-PCR화ELISA방법 검측MUC5AC mRNA표체화단백분비량.결과 견장능현저승고인기도점막상피세포포내ca<'2+>농도、MUC5AC mRNA화단백표체(균P<0.01).U0126화SB203580능억제견장소치MUC5AC mRNA화단백표체증가(균P<0.01).결론 궤계견장능승고인기도점막상피세포점단백표체,기궤제가능여포내Ca<'2+>농도적승고이급ERK1/2、p38 MAPK신호통로유관.
