CAJ | 학술논문

目的探讨蛋白激酶C(PKC)α与浅表膀胱癌细胞分化及内源性耐药的关系.方法采用蛋白印迹法检测76例临床标本(浅表膀胱癌及正常组织)中PKCα的表达水平,对所有患者行标准化疗后随访4～24个月,分析PKCα表达及活化与复发的关系.应用人浅表膀胱癌细胞系RT4细胞,建立能够稳定表达PKCα-绿色荧光蛋白(GFP)的人膀胱癌细胞系RT4/PKCα-GFP.用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)测定RT4/PKCα-GFP和亲代细胞对阿霉素的敏感性.分别检测PKCα激活和抑制状态下RT4/PKCα-GFP对阿霉素敏感性的差异.结果在癌组织中,PKCα总体表达水平和胞膜、胞浆中表达水平的比值(M/C值),均显著高于正常组织(癌组织为正常组织的2.2倍,t=1.98,P<0.05;M/C值癌组织为0.84±0.12,正常组织为0.23±0.11,t=2.62,P<0.01).随着肿瘤分级的升高,胞膜中PKCα的相对表达的水平显著升高(P<0.01),胞浆中的相对表达水平显著下降(P<0.01),PKCα的M/C值显著升高(P<0.01),总体PKCα相对表达水平显著升高(P<0.01).70例获随访,共复发38例.多因素分析表明,高PKCα M/C值是影响化疗后近期复发的独立预后因素(相对危险度3.98,95%可信区间 1.22～5.68,P=0.03).转染PKCα基因后,RT4细胞对阿霉素的耐药性增强 (耐药指数6.97, t=3.24, P<0.01).PKCα的激活显著提高了RT4细胞的耐药性(耐药指数148.11, t=5.18, P<0.001),而抑制PKCα活性则使耐药指数降至1.6(t=1.29, P>0.05).结论 PKCα的异常活化和表达上调与浅表膀胱癌的分化及对阿霉素的内源性耐药密切相关.
목적탐토단백격매C(PKC)α여천표방광암세포분화급내원성내약적관계.방법채용단백인적법검측76례림상표본(천표방광암급정상조직)중PKCα적표체수평,대소유환자행표준화료후수방4～24개월,분석PKCα표체급활화여복발적관계.응용인천표방광암세포계RT4세포,건립능구은정표체PKCα-록색형광단백(GFP)적인방광암세포계RT4/PKCα-GFP.용사갑기우담서람비색법(MTT)측정RT4/PKCα-GFP화친대세포대아매소적민감성.분별검측PKCα격활화억제상태하RT4/PKCα-GFP대아매소민감성적차이.결과재암조직중,PKCα총체표체수평화포막、포장중표체수평적비치(M/C치),균현저고우정상조직(암조직위정상조직적2.2배,t=1.98,P<0.05;M/C치암조직위0.84±0.12,정상조직위0.23±0.11,t=2.62,P<0.01).수착종류분급적승고,포막중PKCα적상대표체적수평현저승고(P<0.01),포장중적상대표체수평현저하강(P<0.01),PKCα적M/C치현저승고(P<0.01),총체PKCα상대표체수평현저승고(P<0.01).70례획수방,공복발38례.다인소분석표명,고PKCα M/C치시영향화료후근기복발적독립예후인소(상대위험도3.98,95%가신구간 1.22～5.68,P=0.03).전염PKCα기인후,RT4세포대아매소적내약성증강 (내약지수6.97, t=3.24, P<0.01).PKCα적격활현저제고료RT4세포적내약성(내약지수148.11, t=5.18, P<0.001),이억제PKCα활성칙사내약지수강지1.6(t=1.29, P>0.05).결론 PKCα적이상활화화표체상조여천표방광암적분화급대아매소적내원성내약밀절상관.