石河子大学学报（自然科学版）
石河子大學學報（自然科學版）
석하자대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SHIHEZI UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE)
2004年
5期
408-410
,共3页
楚敏%赵虎基%郑明刚%刘红玲%乐锦华
楚敏%趙虎基%鄭明剛%劉紅玲%樂錦華
초민%조호기%정명강%류홍령%악금화
ACCase%BC功能域%克隆%原核表达%载体
ACCase%BC功能域%剋隆%原覈錶達%載體
ACCase%BC공능역%극륭%원핵표체%재체
根据已知的乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)序列设计合成了1对引物,对ACCase基因的BC功能域进行扩增,所得产物与预期片段大小一致,约1.8kb.该片段与克隆载体PGEM-T Ease连接,转入感受态大肠杆菌DH5а中增殖.提取质粒进行PCR鉴定,将阳性克隆与原核表达载体PQE30分别用Kpn Ⅰ和Sal Ⅰ双酶切后回收目的片段进行连接,并转入感受态大肠杆菌M15中,所获重组质粒经过酶切、测序鉴定,证实含有目的片段,且连接、构建正确.
根據已知的乙酰輔酶A羧化酶(ACCase)序列設計閤成瞭1對引物,對ACCase基因的BC功能域進行擴增,所得產物與預期片段大小一緻,約1.8kb.該片段與剋隆載體PGEM-T Ease連接,轉入感受態大腸桿菌DH5а中增殖.提取質粒進行PCR鑒定,將暘性剋隆與原覈錶達載體PQE30分彆用Kpn Ⅰ和Sal Ⅰ雙酶切後迴收目的片段進行連接,併轉入感受態大腸桿菌M15中,所穫重組質粒經過酶切、測序鑒定,證實含有目的片段,且連接、構建正確.
근거이지적을선보매A최화매(ACCase)서렬설계합성료1대인물,대ACCase기인적BC공능역진행확증,소득산물여예기편단대소일치,약1.8kb.해편단여극륭재체PGEM-T Ease련접,전입감수태대장간균DH5а중증식.제취질립진행PCR감정,장양성극륭여원핵표체재체PQE30분별용Kpn Ⅰ화Sal Ⅰ쌍매절후회수목적편단진행련접,병전입감수태대장간균M15중,소획중조질립경과매절、측서감정,증실함유목적편단,차련접、구건정학.
