CAJ | 학술논문

为研究蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)在小鼠早期发育中的调节作用,运用超排卵和体外受精技术,采用体外磷酸化和放射自显影的方法,鉴定小鼠1-细胞期受精卵中PKC的底物.经特殊的反复冻融处理,消除卵中内源性蛋白激酶活性.55个受精卵的样品中加入部分纯化的PKC,结合应用较强的PKC抑制剂H-7和星形孢菌素以及促分裂原活化蛋白激酶抑制剂PD098059作为对照,观察到12条PKC底物蛋白的放射自显影带,根据标准蛋白质Rf值绘制的标准曲线计算,这些磷酸化蛋白的相对分子量分别约为120 kDa、100 kDa、79 kDa、63 kDa、59 kDa、47 kDa、40 kDa、34 kDa、32 kDa、26 kDa、24 kDa和22 kDa.实验结果表明,PKC可通过底物蛋白活性的调节,在小鼠早期发育中发挥重要作用.
위연구단백격매C(protein kinase C,PKC)재소서조기발육중적조절작용,운용초배란화체외수정기술,채용체외린산화화방사자현영적방법,감정소서1-세포기수정란중PKC적저물.경특수적반복동융처리,소제란중내원성단백격매활성.55개수정란적양품중가입부분순화적PKC,결합응용교강적PKC억제제H-7화성형포균소이급촉분렬원활화단백격매억제제PD098059작위대조,관찰도12조PKC저물단백적방사자현영대,근거표준단백질Rf치회제적표준곡선계산,저사린산화단백적상대분자량분별약위120 kDa、100 kDa、79 kDa、63 kDa、59 kDa、47 kDa、40 kDa、34 kDa、32 kDa、26 kDa、24 kDa화22 kDa.실험결과표명,PKC가통과저물단백활성적조절,재소서조기발육중발휘중요작용.