植物检疫
植物檢疫
식물검역
PLANT QUARANTINE
2006年
4期
201-204
,共4页
于翠%杨翠云%宋绍祎%洪健
于翠%楊翠雲%宋紹祎%洪健
우취%양취운%송소의%홍건
菜豆荚斑驳病毒%大豆%ELISA%免疫电镜%免疫捕获巢式%RT-PCR
菜豆莢斑駁病毒%大豆%ELISA%免疫電鏡%免疫捕穫巢式%RT-PCR
채두협반박병독%대두%ELISA%면역전경%면역포획소식%RT-PCR
利用DAS-ELISA对进口大豆上BPMV进行检测发现,从美国进口的部分大豆样品对BPMV的多抗血清呈阳性反应;利用免疫吸附电镜观察发现,ELISA检测阳性的大豆种皮病汁液中存在直径约30nm的球状病毒粒子.根据BPMV外壳蛋白(CP)基因的保守序列设计了2对嵌合引物,建立了BPMV的高灵敏的免疫捕获巢式RT-PCR(IC-nested RT-PCR)检测方法.该方法经免疫捕获、反转录和2轮PCR扩增,能从带毒大豆种子中扩增到预期大小的DNA条带.序列测定与分析表明此条带的序列为BPMV部分CP基因,在系统关系树上与BPMV的其它分离物形成一簇亲缘关系很近.实验表明从进境大豆上检测到了BPMV.
利用DAS-ELISA對進口大豆上BPMV進行檢測髮現,從美國進口的部分大豆樣品對BPMV的多抗血清呈暘性反應;利用免疫吸附電鏡觀察髮現,ELISA檢測暘性的大豆種皮病汁液中存在直徑約30nm的毬狀病毒粒子.根據BPMV外殼蛋白(CP)基因的保守序列設計瞭2對嵌閤引物,建立瞭BPMV的高靈敏的免疫捕穫巢式RT-PCR(IC-nested RT-PCR)檢測方法.該方法經免疫捕穫、反轉錄和2輪PCR擴增,能從帶毒大豆種子中擴增到預期大小的DNA條帶.序列測定與分析錶明此條帶的序列為BPMV部分CP基因,在繫統關繫樹上與BPMV的其它分離物形成一簇親緣關繫很近.實驗錶明從進境大豆上檢測到瞭BPMV.
이용DAS-ELISA대진구대두상BPMV진행검측발현,종미국진구적부분대두양품대BPMV적다항혈청정양성반응;이용면역흡부전경관찰발현,ELISA검측양성적대두충피병즙액중존재직경약30nm적구상병독입자.근거BPMV외각단백(CP)기인적보수서렬설계료2대감합인물,건립료BPMV적고령민적면역포획소식RT-PCR(IC-nested RT-PCR)검측방법.해방법경면역포획、반전록화2륜PCR확증,능종대독대두충자중확증도예기대소적DNA조대.서렬측정여분석표명차조대적서렬위BPMV부분CP기인,재계통관계수상여BPMV적기타분리물형성일족친연관계흔근.실험표명종진경대두상검측도료BPMV.
