CAJ | 학술논문

[目的]构建携带SARS冠状病毒刺突蛋白N端基因片段的重组腺病毒.[方法]从SARS病毒cDNA扩增刺突蛋白N端基因片段(-45～1469nt,截短的S1区,SN),插入腺病毒穿梭质粒pShuttle,通过体外连接法构建重组腺病毒Ad-SN.用Ad-SN感染Vero-E6细胞,通过RT-PCR和Western blot法检测SN的表达.[结果]克隆的SN基因序列与文献报道基本一致;Ad-SN基因组结构与预期一致.在Ad-SN感染的Vero-E6细胞中存在SN基因的转录和分泌型SN蛋白的表达.[结论]体外连接法是一种简便易行的重组腺病毒载体构建方法;重组腺病毒Ad-SN能正确表达分泌型SN蛋白,可用于诱导抗SARS免疫的动物实验研究.
[목적]구건휴대SARS관상병독자돌단백N단기인편단적중조선병독.[방법]종SARS병독cDNA확증자돌단백N단기인편단(-45～1469nt,절단적S1구,SN),삽입선병독천사질립pShuttle,통과체외련접법구건중조선병독Ad-SN.용Ad-SN감염Vero-E6세포,통과RT-PCR화Western blot법검측SN적표체.[결과]극륭적SN기인서렬여문헌보도기본일치;Ad-SN기인조결구여예기일치.재Ad-SN감염적Vero-E6세포중존재SN기인적전록화분비형SN단백적표체.[결론]체외련접법시일충간편역행적중조선병독재체구건방법;중조선병독Ad-SN능정학표체분비형SN단백,가용우유도항SARS면역적동물실험연구.