中国兽医学报
中國獸醫學報
중국수의학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE
2008年
9期
1000-1003
,共4页
高金拽%王小强%祁会彩%黄鹤%陈超%李铮
高金拽%王小彊%祁會綵%黃鶴%陳超%李錚
고금예%왕소강%기회채%황학%진초%리쟁
猪疫病病毒%寡核苷酸芯片%不时称PCR
豬疫病病毒%寡覈苷痠芯片%不時稱PCR
저역병병독%과핵감산심편%불시칭PCR
将猪细小病毒(PPV)、猪圆环病毒-Ⅱ(PCV-2)、猪瘟病毒(CSFV)分别应用生物信息学方法,针对病毒基因组保守序列设计特异性强的60-mer寡核苷酸探针,并将其按所设计阵列固定于表面经氨基化修饰的玻片上,制备出寡核苷酸芯片.分别设计出相应的引物,对待测样本进行不对称PCR扩增,从而产生大量可与寡核苷酸探针特异性互补的单链DNA片段,并通过间接荧光标记技术使扩增产物标记上荧光染料.将标有荧光染料的扩增产物与芯片上寡核苷酸探针杂交.扫描、分析芯片上荧光信号.试验结果表明,芯片上各样本对应探针位点呈现阳性荧光信号.而阴性对照和空白对照则基本不能检测到荧光信号.不对称PCR技术制备的单链DNA片段与寡核苷酸芯片进行杂交反应可同时、快速、特异性地检测多种猪疫病病毒.
將豬細小病毒(PPV)、豬圓環病毒-Ⅱ(PCV-2)、豬瘟病毒(CSFV)分彆應用生物信息學方法,針對病毒基因組保守序列設計特異性彊的60-mer寡覈苷痠探針,併將其按所設計陣列固定于錶麵經氨基化脩飾的玻片上,製備齣寡覈苷痠芯片.分彆設計齣相應的引物,對待測樣本進行不對稱PCR擴增,從而產生大量可與寡覈苷痠探針特異性互補的單鏈DNA片段,併通過間接熒光標記技術使擴增產物標記上熒光染料.將標有熒光染料的擴增產物與芯片上寡覈苷痠探針雜交.掃描、分析芯片上熒光信號.試驗結果錶明,芯片上各樣本對應探針位點呈現暘性熒光信號.而陰性對照和空白對照則基本不能檢測到熒光信號.不對稱PCR技術製備的單鏈DNA片段與寡覈苷痠芯片進行雜交反應可同時、快速、特異性地檢測多種豬疫病病毒.
장저세소병독(PPV)、저원배병독-Ⅱ(PCV-2)、저온병독(CSFV)분별응용생물신식학방법,침대병독기인조보수서렬설계특이성강적60-mer과핵감산탐침,병장기안소설계진렬고정우표면경안기화수식적파편상,제비출과핵감산심편.분별설계출상응적인물,대대측양본진행불대칭PCR확증,종이산생대량가여과핵감산탐침특이성호보적단련DNA편단,병통과간접형광표기기술사확증산물표기상형광염료.장표유형광염료적확증산물여심편상과핵감산탐침잡교.소묘、분석심편상형광신호.시험결과표명,심편상각양본대응탐침위점정현양성형광신호.이음성대조화공백대조칙기본불능검측도형광신호.불대칭PCR기술제비적단련DNA편단여과핵감산심편진행잡교반응가동시、쾌속、특이성지검측다충저역병병독.
