中西医结合学报
中西醫結閤學報
중서의결합학보
JOURNAL OF CHINESE INTEGRATIVE MDEICINE
2009年
1期
65-69
,共5页
川芎嗪注射液%腹膜间皮细胞%高糖%I型胶原%基质金属蛋白酶-1%基质金属蛋白酶抑制剂-1%体外实验
川芎嗪註射液%腹膜間皮細胞%高糖%I型膠原%基質金屬蛋白酶-1%基質金屬蛋白酶抑製劑-1%體外實驗
천궁진주사액%복막간피세포%고당%I형효원%기질금속단백매-1%기질금속단백매억제제-1%체외실험
目的:研究川芎嗪注射液对体外培养的人腹膜间皮细胞(human peritoneal mesothelial cells,HPMCs)在高糖刺激下Ⅰ型胶原、基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)和金属蛋白酶组织抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)表达的影响.方法:胰蛋白酶消化法从人腹膜组织中分离间皮细胞进行原代培养并传代,分为5组(每组设3个样本):正常组(完全培养液)、高糖对照组(2.5%葡萄糖)和高糖(2.5%葡萄糖)加低、中、高剂量川芎嗪(10、20和40 mg/L)组.采用半定量逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测细胞内I型胶原、MMP-1和TIMP-1 mRNA表达;酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosor-bent assay,ELISA)法检测细胞上清液中Ⅰ型胶原、MMP-1和TIMP-1的蛋白质水平,用二喹啉甲酸(bicinchoninic acid,BCA)蛋白检测法测定细胞中蛋白质含量,用以校正ELISA结果.结果:川芎嗪能显著降低高糖所致的HPMCs Ⅰ型胶原和TIMP-1的表达(P<0.05,P<0.01),两者在蛋白质和基因水平均呈量效关系;且中、高剂量川芎嗪能显著增加MMP-1的表达(P<0.05).结论:川芎嗪能减少HPMCs高糖刺激下Ⅰ型胶原的合成,并且通过调节MMP-1/TIMP-1的平衡,促进I型胶原降解.
目的:研究川芎嗪註射液對體外培養的人腹膜間皮細胞(human peritoneal mesothelial cells,HPMCs)在高糖刺激下Ⅰ型膠原、基質金屬蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)和金屬蛋白酶組織抑製劑-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)錶達的影響.方法:胰蛋白酶消化法從人腹膜組織中分離間皮細胞進行原代培養併傳代,分為5組(每組設3箇樣本):正常組(完全培養液)、高糖對照組(2.5%葡萄糖)和高糖(2.5%葡萄糖)加低、中、高劑量川芎嗪(10、20和40 mg/L)組.採用半定量逆轉錄聚閤酶鏈反應(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)法檢測細胞內I型膠原、MMP-1和TIMP-1 mRNA錶達;酶聯免疫吸附測定(enzyme-linked immunosor-bent assay,ELISA)法檢測細胞上清液中Ⅰ型膠原、MMP-1和TIMP-1的蛋白質水平,用二喹啉甲痠(bicinchoninic acid,BCA)蛋白檢測法測定細胞中蛋白質含量,用以校正ELISA結果.結果:川芎嗪能顯著降低高糖所緻的HPMCs Ⅰ型膠原和TIMP-1的錶達(P<0.05,P<0.01),兩者在蛋白質和基因水平均呈量效關繫;且中、高劑量川芎嗪能顯著增加MMP-1的錶達(P<0.05).結論:川芎嗪能減少HPMCs高糖刺激下Ⅰ型膠原的閤成,併且通過調節MMP-1/TIMP-1的平衡,促進I型膠原降解.
목적:연구천궁진주사액대체외배양적인복막간피세포(human peritoneal mesothelial cells,HPMCs)재고당자격하Ⅰ형효원、기질금속단백매-1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)화금속단백매조직억제제-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)표체적영향.방법:이단백매소화법종인복막조직중분리간피세포진행원대배양병전대,분위5조(매조설3개양본):정상조(완전배양액)、고당대조조(2.5%포도당)화고당(2.5%포도당)가저、중、고제량천궁진(10、20화40 mg/L)조.채용반정량역전록취합매련반응(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)법검측세포내I형효원、MMP-1화TIMP-1 mRNA표체;매련면역흡부측정(enzyme-linked immunosor-bent assay,ELISA)법검측세포상청액중Ⅰ형효원、MMP-1화TIMP-1적단백질수평,용이규람갑산(bicinchoninic acid,BCA)단백검측법측정세포중단백질함량,용이교정ELISA결과.결과:천궁진능현저강저고당소치적HPMCs Ⅰ형효원화TIMP-1적표체(P<0.05,P<0.01),량자재단백질화기인수평균정량효관계;차중、고제량천궁진능현저증가MMP-1적표체(P<0.05).결론:천궁진능감소HPMCs고당자격하Ⅰ형효원적합성,병차통과조절MMP-1/TIMP-1적평형,촉진I형효원강해.
