中国现代医药杂志
中國現代醫藥雜誌
중국현대의약잡지
MODERN MEDICINE JOURNAL OF CHINA
2009年
1期
10-13
,共4页
王鹏%沈忆新%陆政峰%毛路%范志海%包普花
王鵬%瀋憶新%陸政峰%毛路%範誌海%包普花
왕붕%침억신%륙정봉%모로%범지해%포보화
全骨髓培养法%骨髓间充质干细胞%诱导分化
全骨髓培養法%骨髓間充質榦細胞%誘導分化
전골수배양법%골수간충질간세포%유도분화
目的 目前尚缺乏标准的骨髓间充质干细胞(BMSCs)的分离方法 ,实验通过全骨髓培养法分离纯化骨髓间充质干细胞,并诱导分化为神经样细胞,以寻找一种简便、实用的分离方法 .方法 取大鼠骨髓.全骨髓培养法结合差速贴壁法分离纯化大鼠骨髓间充质干细胞,传代扩增.倒置相差显微镜下观察骨髓间充质干细胞形态及生物学特点,免疫组化染色鉴定细胞.用MTT法间接测定不同代数细胞活力.诱导分化.先用碱性成纤维细胞生长冈子(bFGF)预诱导24h,然后加入丁羟基茴香醚诱导(BHA)和二甲基亚砜(DMSO)诱导.观察诱导过程中细胞的形态变化,并用免疫组化染色法鉴定细胞.结果 全骨髓培养法成功分离培养BMSCs,免疫荧光染色示CD90、CD71、CD106表达阳性.CD45阴性.MTT法检测细胞活力示2、4、6代细胞于酶标仪490 nm波长处吸光度值均高于第8、10代细胞.细胞经诱导后,细胞呈神经样细胞形态,并且神经元特异性表面标志β微管蛋白(β-Ⅲ-Tubulin)、巢蛋白(Nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)表达阳性.结论 采用全骨髓培养法可获得较纯化的骨髓间充质干细胞,其在适宜的诱导分化条件下可诱导分化为神经样细胞.
目的 目前尚缺乏標準的骨髓間充質榦細胞(BMSCs)的分離方法 ,實驗通過全骨髓培養法分離純化骨髓間充質榦細胞,併誘導分化為神經樣細胞,以尋找一種簡便、實用的分離方法 .方法 取大鼠骨髓.全骨髓培養法結閤差速貼壁法分離純化大鼠骨髓間充質榦細胞,傳代擴增.倒置相差顯微鏡下觀察骨髓間充質榦細胞形態及生物學特點,免疫組化染色鑒定細胞.用MTT法間接測定不同代數細胞活力.誘導分化.先用堿性成纖維細胞生長岡子(bFGF)預誘導24h,然後加入丁羥基茴香醚誘導(BHA)和二甲基亞砜(DMSO)誘導.觀察誘導過程中細胞的形態變化,併用免疫組化染色法鑒定細胞.結果 全骨髓培養法成功分離培養BMSCs,免疫熒光染色示CD90、CD71、CD106錶達暘性.CD45陰性.MTT法檢測細胞活力示2、4、6代細胞于酶標儀490 nm波長處吸光度值均高于第8、10代細胞.細胞經誘導後,細胞呈神經樣細胞形態,併且神經元特異性錶麵標誌β微管蛋白(β-Ⅲ-Tubulin)、巢蛋白(Nestin)、神經元特異性烯醇化酶(NSE)錶達暘性.結論 採用全骨髓培養法可穫得較純化的骨髓間充質榦細胞,其在適宜的誘導分化條件下可誘導分化為神經樣細胞.
목적 목전상결핍표준적골수간충질간세포(BMSCs)적분리방법 ,실험통과전골수배양법분리순화골수간충질간세포,병유도분화위신경양세포,이심조일충간편、실용적분리방법 .방법 취대서골수.전골수배양법결합차속첩벽법분리순화대서골수간충질간세포,전대확증.도치상차현미경하관찰골수간충질간세포형태급생물학특점,면역조화염색감정세포.용MTT법간접측정불동대수세포활력.유도분화.선용감성성섬유세포생장강자(bFGF)예유도24h,연후가입정간기회향미유도(BHA)화이갑기아풍(DMSO)유도.관찰유도과정중세포적형태변화,병용면역조화염색법감정세포.결과 전골수배양법성공분리배양BMSCs,면역형광염색시CD90、CD71、CD106표체양성.CD45음성.MTT법검측세포활력시2、4、6대세포우매표의490 nm파장처흡광도치균고우제8、10대세포.세포경유도후,세포정신경양세포형태,병차신경원특이성표면표지β미관단백(β-Ⅲ-Tubulin)、소단백(Nestin)、신경원특이성희순화매(NSE)표체양성.결론 채용전골수배양법가획득교순화적골수간충질간세포,기재괄의적유도분화조건하가유도분화위신경양세포.
