江苏大学学报（医学版）
江囌大學學報（醫學版）
강소대학학보（의학판）
JOURNAL OF JIANGSU UNIVERSITY (MEDICINE EDITION)
2012年
3期
236-241
,共6页
胡一明%李坚%陈永昌%吴燕
鬍一明%李堅%陳永昌%吳燕
호일명%리견%진영창%오연
肺癌细胞%顺铂%FA/BRCA途径%耐药
肺癌細胞%順鉑%FA/BRCA途徑%耐藥
폐암세포%순박%FA/BRCA도경%내약
目的:研究顺铂(DDP)对肺癌细胞FANCC、FANCF、FANCL表达水平的影响,探讨FA/BRCA途径DNA损伤修复功能在肺癌细胞对顺铂耐药机制中的作用.方法:采用CCK-8法测定经不同浓度顺铂处理24、48 h后两种肺癌细胞株(A549和Calu-1)的细胞增殖抑制率.应用实时荧光定量PCR技术(RFQ-PCR)和蛋白质印迹法检测两类肺癌细胞株中的FANCC、FANCF、FANCL mRNA和蛋白的表达.结果:肺癌A549细胞和Calu-1细胞的增殖抑制率均随顺铂浓度和作用时间的不同而变化,呈剂量依赖性(P＜0.05)和时间依赖性(P＜0.05),Calu-1细胞的半数抑制浓度( IC50)明显高于A549细胞.肺癌A549细胞除在10 μg/ml浓度顺铂处理24h后FANCF和FANCL mRNA表达水平增高外,2.5-5 μg/ml和20μg/ml浓度顺铂时FANCF和FANCL mRNA呈无变化和低表达(P＜0.05).细胞Calu-1经不同浓度顺铂处理后的FANCC和FANCF mRNA表达水平先增高后降低(P＜0.05).肺癌A549细胞中的FANCC、FANCF和FANCL蛋白表达水平随顺铂浓度增高呈进行性降低.而肺癌Calu-1细胞的FANCF蛋白表达水平在顺铂浓度5 - 10 μg/ml范围内较对照组明显增高.结论:Calu-1细胞对顺铂的耐药性显著高于A549细胞,其机制之一可能是FA/BRCA途径中FANCF蛋白高表达的结果.
目的:研究順鉑(DDP)對肺癌細胞FANCC、FANCF、FANCL錶達水平的影響,探討FA/BRCA途徑DNA損傷脩複功能在肺癌細胞對順鉑耐藥機製中的作用.方法:採用CCK-8法測定經不同濃度順鉑處理24、48 h後兩種肺癌細胞株(A549和Calu-1)的細胞增殖抑製率.應用實時熒光定量PCR技術(RFQ-PCR)和蛋白質印跡法檢測兩類肺癌細胞株中的FANCC、FANCF、FANCL mRNA和蛋白的錶達.結果:肺癌A549細胞和Calu-1細胞的增殖抑製率均隨順鉑濃度和作用時間的不同而變化,呈劑量依賴性(P＜0.05)和時間依賴性(P＜0.05),Calu-1細胞的半數抑製濃度( IC50)明顯高于A549細胞.肺癌A549細胞除在10 μg/ml濃度順鉑處理24h後FANCF和FANCL mRNA錶達水平增高外,2.5-5 μg/ml和20μg/ml濃度順鉑時FANCF和FANCL mRNA呈無變化和低錶達(P＜0.05).細胞Calu-1經不同濃度順鉑處理後的FANCC和FANCF mRNA錶達水平先增高後降低(P＜0.05).肺癌A549細胞中的FANCC、FANCF和FANCL蛋白錶達水平隨順鉑濃度增高呈進行性降低.而肺癌Calu-1細胞的FANCF蛋白錶達水平在順鉑濃度5 - 10 μg/ml範圍內較對照組明顯增高.結論:Calu-1細胞對順鉑的耐藥性顯著高于A549細胞,其機製之一可能是FA/BRCA途徑中FANCF蛋白高錶達的結果.
목적:연구순박(DDP)대폐암세포FANCC、FANCF、FANCL표체수평적영향,탐토FA/BRCA도경DNA손상수복공능재폐암세포대순박내약궤제중적작용.방법:채용CCK-8법측정경불동농도순박처리24、48 h후량충폐암세포주(A549화Calu-1)적세포증식억제솔.응용실시형광정량PCR기술(RFQ-PCR)화단백질인적법검측량류폐암세포주중적FANCC、FANCF、FANCL mRNA화단백적표체.결과:폐암A549세포화Calu-1세포적증식억제솔균수순박농도화작용시간적불동이변화,정제량의뢰성(P＜0.05)화시간의뢰성(P＜0.05),Calu-1세포적반수억제농도( IC50)명현고우A549세포.폐암A549세포제재10 μg/ml농도순박처리24h후FANCF화FANCL mRNA표체수평증고외,2.5-5 μg/ml화20μg/ml농도순박시FANCF화FANCL mRNA정무변화화저표체(P＜0.05).세포Calu-1경불동농도순박처리후적FANCC화FANCF mRNA표체수평선증고후강저(P＜0.05).폐암A549세포중적FANCC、FANCF화FANCL단백표체수평수순박농도증고정진행성강저.이폐암Calu-1세포적FANCF단백표체수평재순박농도5 - 10 μg/ml범위내교대조조명현증고.결론:Calu-1세포대순박적내약성현저고우A549세포,기궤제지일가능시FA/BRCA도경중FANCF단백고표체적결과.
