分析测试学报
分析測試學報
분석측시학보
JOURNAL OF INSTRUMENTAL ANALYSIS
2012年
8期
928-932
,共5页
王珊珊%赵汝松%苑金鹏%赵金
王珊珊%趙汝鬆%苑金鵬%趙金
왕산산%조여송%원금붕%조금
四极杆-飞行时间质谱%非标记定量检测%牛血清白蛋白
四極桿-飛行時間質譜%非標記定量檢測%牛血清白蛋白
사겁간-비행시간질보%비표기정량검측%우혈청백단백
以四极杆飞行时间质谱检测的蛋白肽段的质谱信息为基础,开发了一种简单、准确的蛋白定性、定量检测方法,并用于牛血清白蛋白的定性、定量检测.对酶解肽段的梯度洗脱条件和流速等液相色谱条件进行了优化;进行蛋白样品的酶解及质谱检测,利用MassHunter定量软件对数据进行分析;为减少假阳性结果的出现,实验优化了数据处理软件中的设置参数,并对方法的重现性进行了考察.结果显示,重复检测的8个肽段峰面积的RSD均在3.0%以下.该方法对牛血清白蛋白的检出限为100 ng.实验发现,样品中蛋白的含量与检测到的肽段匹配率呈对数关系,并从检测到的丰度较高的8个肽段中确定可用于BSA蛋白定性检测的肽段为:HLVDEPQNLIK,定量检测的肽段为:ATEEQLK,方法的回收率为106%.该方法操作简便,检测快速,成本较低,专一性强,可用于蛋白特异性肽段的筛选及复杂生物样品中蛋白的检测.
以四極桿飛行時間質譜檢測的蛋白肽段的質譜信息為基礎,開髮瞭一種簡單、準確的蛋白定性、定量檢測方法,併用于牛血清白蛋白的定性、定量檢測.對酶解肽段的梯度洗脫條件和流速等液相色譜條件進行瞭優化;進行蛋白樣品的酶解及質譜檢測,利用MassHunter定量軟件對數據進行分析;為減少假暘性結果的齣現,實驗優化瞭數據處理軟件中的設置參數,併對方法的重現性進行瞭攷察.結果顯示,重複檢測的8箇肽段峰麵積的RSD均在3.0%以下.該方法對牛血清白蛋白的檢齣限為100 ng.實驗髮現,樣品中蛋白的含量與檢測到的肽段匹配率呈對數關繫,併從檢測到的豐度較高的8箇肽段中確定可用于BSA蛋白定性檢測的肽段為:HLVDEPQNLIK,定量檢測的肽段為:ATEEQLK,方法的迴收率為106%.該方法操作簡便,檢測快速,成本較低,專一性彊,可用于蛋白特異性肽段的篩選及複雜生物樣品中蛋白的檢測.
이사겁간비행시간질보검측적단백태단적질보신식위기출,개발료일충간단、준학적단백정성、정량검측방법,병용우우혈청백단백적정성、정량검측.대매해태단적제도세탈조건화류속등액상색보조건진행료우화;진행단백양품적매해급질보검측,이용MassHunter정량연건대수거진행분석;위감소가양성결과적출현,실험우화료수거처리연건중적설치삼수,병대방법적중현성진행료고찰.결과현시,중복검측적8개태단봉면적적RSD균재3.0%이하.해방법대우혈청백단백적검출한위100 ng.실험발현,양품중단백적함량여검측도적태단필배솔정대수관계,병종검측도적봉도교고적8개태단중학정가용우BSA단백정성검측적태단위:HLVDEPQNLIK,정량검측적태단위:ATEEQLK,방법적회수솔위106%.해방법조작간편,검측쾌속,성본교저,전일성강,가용우단백특이성태단적사선급복잡생물양품중단백적검측.