自然科学进展
自然科學進展
자연과학진전
zirankexuejinzhan
2003年
12期
1253-1258
,共6页
朱兴国%仇润祥%刘丽%唐国敏
硃興國%仇潤祥%劉麗%唐國敏
주흥국%구윤상%류려%당국민
黑曲霉糖化酶%CCAAT结合蛋白%DNA-蛋白相互作用%蛋白纯化
黑麯黴糖化酶%CCAAT結閤蛋白%DNA-蛋白相互作用%蛋白純化
흑곡매당화매%CCAAT결합단백%DNA-단백상호작용%단백순화
依次通过20%～40%饱和硫酸铵、凝胶过滤、肝素柱层析及DNA亲和层析纯化了黑曲霉糖化酶启动子区CCAAT框DC(-489 bp～-414 bp)结合蛋白(AngCP1)及CCAAT框PC(-390 bp～-345 bp)结合蛋白(AngCP2).凝胶过滤分析和SDS-PAGE结果表明AngCP1和AngCP2的分子质量均约为120 ku,由分子质量为34 ku和50 ku的亚基组成.Western blot显示两者的34 ku亚基均能特异性地与鼠抗AngHapC抗体产生反应,进一步的电泳迁移率实验证实AngCP1和AngCP2为同一蛋白质,称为AngCP.Southwestern blot显示34 ku亚基结合于DC,而50 ku亚基结合于PC,并且34ku亚基与DC的结合能力强于50 ku亚基与PC的结合.上述AngCP具有与DC,PC不等结合强度的特点暗示三者在糖化酶表达调控中有着重要作用.
依次通過20%～40%飽和硫痠銨、凝膠過濾、肝素柱層析及DNA親和層析純化瞭黑麯黴糖化酶啟動子區CCAAT框DC(-489 bp～-414 bp)結閤蛋白(AngCP1)及CCAAT框PC(-390 bp～-345 bp)結閤蛋白(AngCP2).凝膠過濾分析和SDS-PAGE結果錶明AngCP1和AngCP2的分子質量均約為120 ku,由分子質量為34 ku和50 ku的亞基組成.Western blot顯示兩者的34 ku亞基均能特異性地與鼠抗AngHapC抗體產生反應,進一步的電泳遷移率實驗證實AngCP1和AngCP2為同一蛋白質,稱為AngCP.Southwestern blot顯示34 ku亞基結閤于DC,而50 ku亞基結閤于PC,併且34ku亞基與DC的結閤能力彊于50 ku亞基與PC的結閤.上述AngCP具有與DC,PC不等結閤彊度的特點暗示三者在糖化酶錶達調控中有著重要作用.
의차통과20%～40%포화류산안、응효과려、간소주층석급DNA친화층석순화료흑곡매당화매계동자구CCAAT광DC(-489 bp～-414 bp)결합단백(AngCP1)급CCAAT광PC(-390 bp～-345 bp)결합단백(AngCP2).응효과려분석화SDS-PAGE결과표명AngCP1화AngCP2적분자질량균약위120 ku,유분자질량위34 ku화50 ku적아기조성.Western blot현시량자적34 ku아기균능특이성지여서항AngHapC항체산생반응,진일보적전영천이솔실험증실AngCP1화AngCP2위동일단백질,칭위AngCP.Southwestern blot현시34 ku아기결합우DC,이50 ku아기결합우PC,병차34ku아기여DC적결합능력강우50 ku아기여PC적결합.상술AngCP구유여DC,PC불등결합강도적특점암시삼자재당화매표체조공중유착중요작용.
