农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2005年
3期
304-309
,共6页
洪波%张常青%李邱华%高俊平%KASUGA Mie%SHINOZAKI-YAMAGUCHI Kazuko
洪波%張常青%李邱華%高俊平%KASUGA Mie%SHINOZAKI-YAMAGUCHI Kazuko
홍파%장상청%리구화%고준평%KASUGA Mie%SHINOZAKI-YAMAGUCHI Kazuko
地被菊花%再生植株%遗传转化
地被菊花%再生植株%遺傳轉化
지피국화%재생식주%유전전화
以地被菊花(Dendranthemagrandiflorum cv.White Snow)无菌苗叶片为外植体,在附加不同浓度植物生长调节剂的MS基础培养基上诱导培养,通过器官直接发生途径获得再生植株.结果表明,2.0 mg/L 6-BA和0.2 mg/LNAA组合可获得93.8%的再生芽.将含拟南芥(Arabidopsisthaliana)逆境诱导转录因子DREB1A基因的植物表达载体pBI-DREBM导入根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)LBA4404,农杆菌介导法遗传转化地被菊花White Snow叶盘,经PCR和PCR-Southem检测,DREB1A基因已整合到转化植株的基因组中.遗传转化过程中,预培养2 d后,将OD600=0.5～0.7的根癌农杆菌稀释30倍后侵染叶盘10 min,再共培养2 d,有利于获得最高遗传转化效率.
以地被菊花(Dendranthemagrandiflorum cv.White Snow)無菌苗葉片為外植體,在附加不同濃度植物生長調節劑的MS基礎培養基上誘導培養,通過器官直接髮生途徑穫得再生植株.結果錶明,2.0 mg/L 6-BA和0.2 mg/LNAA組閤可穫得93.8%的再生芽.將含擬南芥(Arabidopsisthaliana)逆境誘導轉錄因子DREB1A基因的植物錶達載體pBI-DREBM導入根癌農桿菌(Agrobacteriumtumefaciens)LBA4404,農桿菌介導法遺傳轉化地被菊花White Snow葉盤,經PCR和PCR-Southem檢測,DREB1A基因已整閤到轉化植株的基因組中.遺傳轉化過程中,預培養2 d後,將OD600=0.5～0.7的根癌農桿菌稀釋30倍後侵染葉盤10 min,再共培養2 d,有利于穫得最高遺傳轉化效率.
이지피국화(Dendranthemagrandiflorum cv.White Snow)무균묘협편위외식체,재부가불동농도식물생장조절제적MS기출배양기상유도배양,통과기관직접발생도경획득재생식주.결과표명,2.0 mg/L 6-BA화0.2 mg/LNAA조합가획득93.8%적재생아.장함의남개(Arabidopsisthaliana)역경유도전록인자DREB1A기인적식물표체재체pBI-DREBM도입근암농간균(Agrobacteriumtumefaciens)LBA4404,농간균개도법유전전화지피국화White Snow협반,경PCR화PCR-Southem검측,DREB1A기인이정합도전화식주적기인조중.유전전화과정중,예배양2 d후,장OD600=0.5～0.7적근암농간균희석30배후침염협반10 min,재공배양2 d,유리우획득최고유전전화효솔.
