环境工程学报
環境工程學報
배경공정학보
CHINESE JOURNAL OF ENVIRONMENTAL ENGINEERING
2009年
9期
1697-1702
,共6页
丁嫚%李璐%邹莉%温东辉%唐孝炎
丁嫚%李璐%鄒莉%溫東輝%唐孝炎
정만%리로%추리%온동휘%당효염
细胞裂解%DNA纯化%聚合酶链反应(PCR)%变性梯度凝胶电泳(DGGE)%活性污泥
細胞裂解%DNA純化%聚閤酶鏈反應(PCR)%變性梯度凝膠電泳(DGGE)%活性汙泥
세포렬해%DNA순화%취합매련반응(PCR)%변성제도응효전영(DGGE)%활성오니
从处理某制药废水的MBR反应器中采集活性污泥,评价不同DNA提取方法对其总DNA提取效率的影响.DNA提取分细胞裂解和DNA纯化2步,对细胞裂解比较了珠磨匀浆法、反复冻融法、十二烷基磺酸钠(sodium dodecyl sul-fate,SDS)裂解法等7种方法;对DNA纯化比较了酚/氯仿纯化法和胶同收纯化法.结果表明,SDS裂解法、酚-氯仿纯化法最优.通过条件优化实验,确定SDS裂解-酚/氯仿纯化法在污泥量1.1 g,10 000 r/min离心5 min的操作条件下,获得的DNA产量(10 774μg/g泥重)和纯度(OD260:OD280=1.84)等综合指标最好.
從處理某製藥廢水的MBR反應器中採集活性汙泥,評價不同DNA提取方法對其總DNA提取效率的影響.DNA提取分細胞裂解和DNA純化2步,對細胞裂解比較瞭珠磨勻漿法、反複凍融法、十二烷基磺痠鈉(sodium dodecyl sul-fate,SDS)裂解法等7種方法;對DNA純化比較瞭酚/氯倣純化法和膠同收純化法.結果錶明,SDS裂解法、酚-氯倣純化法最優.通過條件優化實驗,確定SDS裂解-酚/氯倣純化法在汙泥量1.1 g,10 000 r/min離心5 min的操作條件下,穫得的DNA產量(10 774μg/g泥重)和純度(OD260:OD280=1.84)等綜閤指標最好.
종처리모제약폐수적MBR반응기중채집활성오니,평개불동DNA제취방법대기총DNA제취효솔적영향.DNA제취분세포렬해화DNA순화2보,대세포렬해비교료주마균장법、반복동융법、십이완기광산납(sodium dodecyl sul-fate,SDS)렬해법등7충방법;대DNA순화비교료분/록방순화법화효동수순화법.결과표명,SDS렬해법、분-록방순화법최우.통과조건우화실험,학정SDS렬해-분/록방순화법재오니량1.1 g,10 000 r/min리심5 min적조작조건하,획득적DNA산량(10 774μg/g니중)화순도(OD260:OD280=1.84)등종합지표최호.
