中国野生植物资源
中國野生植物資源
중국야생식물자원
Chinese Wild Plant Resources
2010年
4期
37-41
,共5页
邓中枢%赵恒田%裴雪%黄福生
鄧中樞%趙恆田%裴雪%黃福生
산중추%조항전%배설%황복생
黑木耳%核糖体失活蛋白基因%3'-快速扩增cDNA末端
黑木耳%覈糖體失活蛋白基因%3'-快速擴增cDNA末耑
흑목이%핵당체실활단백기인%3'-쾌속확증cDNA말단
为了克隆黑木耳核糖体失活蛋白cDNA 3'-端,根据随机测得的中间一段蛋白质序列设计衙并引物,应用RT-PCR和3'-RACE反应方法,将得到的基因片段与质粒连接,并转化至大肠杆菌中,进行蓝白筛选,再通过琼脂糖凝胶电泳法和PCR法验证白斑,从而得到阳性重组质粒,最后克隆出该目的蛋白基因片段.结果表明,克隆出的cDNA 3'-端为330bp的开放阅读框(ORF),编码107个氨基酸和2个终止密码子.经试验证明和文献检索,克隆得到的cDNA 3'-端为一种新基因.
為瞭剋隆黑木耳覈糖體失活蛋白cDNA 3'-耑,根據隨機測得的中間一段蛋白質序列設計衙併引物,應用RT-PCR和3'-RACE反應方法,將得到的基因片段與質粒連接,併轉化至大腸桿菌中,進行藍白篩選,再通過瓊脂糖凝膠電泳法和PCR法驗證白斑,從而得到暘性重組質粒,最後剋隆齣該目的蛋白基因片段.結果錶明,剋隆齣的cDNA 3'-耑為330bp的開放閱讀框(ORF),編碼107箇氨基痠和2箇終止密碼子.經試驗證明和文獻檢索,剋隆得到的cDNA 3'-耑為一種新基因.
위료극륭흑목이핵당체실활단백cDNA 3'-단,근거수궤측득적중간일단단백질서렬설계아병인물,응용RT-PCR화3'-RACE반응방법,장득도적기인편단여질립련접,병전화지대장간균중,진행람백사선,재통과경지당응효전영법화PCR법험증백반,종이득도양성중조질립,최후극륭출해목적단백기인편단.결과표명,극륭출적cDNA 3'-단위330bp적개방열독광(ORF),편마107개안기산화2개종지밀마자.경시험증명화문헌검색,극륭득도적cDNA 3'-단위일충신기인.
