中山大学学报（医学科学版）
中山大學學報（醫學科學版）
중산대학학보（의학과학판）
JOURNAL OF SUN YAT-SEN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2010年
5期
619-623
,共5页
陈思凡%周妮曼%郑琳%柯梁汝%单智铭%冯翔
陳思凡%週妮曼%鄭琳%柯樑汝%單智銘%馮翔
진사범%주니만%정림%가량여%단지명%풍상
白藜芦醇%凋亡%沉默信息调节因子1%细胞色素C%半胱天冬氨酸酶
白藜蘆醇%凋亡%沉默信息調節因子1%細胞色素C%半胱天鼕氨痠酶
백려호순%조망%침묵신식조절인자1%세포색소C%반광천동안산매
[目的]探讨白藜芦醇(Res)对大鼠原代脂肪细胞凋亡的影响及其机制.[方法]培养大鼠原代脂肪细胞,添加不同剂量的Res干预,用Hoechst 33258染色,在荧光显微镜下观察细胞核形态;用DNA Ladder实验观察DNA断裂的条带:检测各组培养基和细胞内的乳酸脱氢酶(LDH)含量,计算LDH漏出率;用流式细胞仪测定细胞凋亡率:Western blot检测相关位点,包括沉默信息调节因子1(sirt1)、细胞色素C(Cytochrome C)、半胱天冬氨酸酶家族(Caspase 9和Caspase 3)的蛋白质表达.[结果]经过Res干预后,细胞核染色质高度凝集,电泳后出现180～200 bp整数倍的寡核苷酸片段.细胞LDH漏出率升高,呈剂量-反应关系(P<0.05或P<0.01).Res作用后细胞凋亡率明显上升,呈剂量-反应关系(P<0.01).Sirt1、Cytochrome C、活化的Caspase 9及Caspase 3表达水平上升,胞浆Cytochrome C释放也增加.[结论]Res促进原代脂肪细胞凋亡,其机制可能是通过增加Sirt1表达,经由线粒体凋亡途径,作用于Caspase 9和Caspase 3.
[目的]探討白藜蘆醇(Res)對大鼠原代脂肪細胞凋亡的影響及其機製.[方法]培養大鼠原代脂肪細胞,添加不同劑量的Res榦預,用Hoechst 33258染色,在熒光顯微鏡下觀察細胞覈形態;用DNA Ladder實驗觀察DNA斷裂的條帶:檢測各組培養基和細胞內的乳痠脫氫酶(LDH)含量,計算LDH漏齣率;用流式細胞儀測定細胞凋亡率:Western blot檢測相關位點,包括沉默信息調節因子1(sirt1)、細胞色素C(Cytochrome C)、半胱天鼕氨痠酶傢族(Caspase 9和Caspase 3)的蛋白質錶達.[結果]經過Res榦預後,細胞覈染色質高度凝集,電泳後齣現180～200 bp整數倍的寡覈苷痠片段.細胞LDH漏齣率升高,呈劑量-反應關繫(P<0.05或P<0.01).Res作用後細胞凋亡率明顯上升,呈劑量-反應關繫(P<0.01).Sirt1、Cytochrome C、活化的Caspase 9及Caspase 3錶達水平上升,胞漿Cytochrome C釋放也增加.[結論]Res促進原代脂肪細胞凋亡,其機製可能是通過增加Sirt1錶達,經由線粒體凋亡途徑,作用于Caspase 9和Caspase 3.
[목적]탐토백려호순(Res)대대서원대지방세포조망적영향급기궤제.[방법]배양대서원대지방세포,첨가불동제량적Res간예,용Hoechst 33258염색,재형광현미경하관찰세포핵형태;용DNA Ladder실험관찰DNA단렬적조대:검측각조배양기화세포내적유산탈경매(LDH)함량,계산LDH루출솔;용류식세포의측정세포조망솔:Western blot검측상관위점,포괄침묵신식조절인자1(sirt1)、세포색소C(Cytochrome C)、반광천동안산매가족(Caspase 9화Caspase 3)적단백질표체.[결과]경과Res간예후,세포핵염색질고도응집,전영후출현180～200 bp정수배적과핵감산편단.세포LDH루출솔승고,정제량-반응관계(P<0.05혹P<0.01).Res작용후세포조망솔명현상승,정제량-반응관계(P<0.01).Sirt1、Cytochrome C、활화적Caspase 9급Caspase 3표체수평상승,포장Cytochrome C석방야증가.[결론]Res촉진원대지방세포조망,기궤제가능시통과증가Sirt1표체,경유선립체조망도경,작용우Caspase 9화Caspase 3.
