湖南农业科学
湖南農業科學
호남농업과학
HUNAN AGRICULTURAL SCIENCES
2010年
21期
9-12
,共4页
谢放%朱子雄%田伟%张楠
謝放%硃子雄%田偉%張楠
사방%주자웅%전위%장남
冬虫夏草%ISSR%PCR%反应体系%优化
鼕蟲夏草%ISSR%PCR%反應體繫%優化
동충하초%ISSR%PCR%반응체계%우화
为进一步研究冬虫夏草的遗传多样性,试验采用改良的CTAB法提取高质量DNA模板,克服了冬虫夏草中富含多糖、蛋白、盐类和色素的影响.建立并优化了冬虫夏草ISSR-PCR最适反应体系,即在25μL体系中反应物的含量分别为:10×PCR Buffer 2.5μL,模板DNA20 ng.引物0.9 μmol/L,dNTP 0.12 mmol/L,M2+1.5 mmol/L,Taq DNA聚合酶0.5 U,引物835号的最适退火温度为50.8℃.结果表明此反应体系标记位点清晰、稳定、重复性好.
為進一步研究鼕蟲夏草的遺傳多樣性,試驗採用改良的CTAB法提取高質量DNA模闆,剋服瞭鼕蟲夏草中富含多糖、蛋白、鹽類和色素的影響.建立併優化瞭鼕蟲夏草ISSR-PCR最適反應體繫,即在25μL體繫中反應物的含量分彆為:10×PCR Buffer 2.5μL,模闆DNA20 ng.引物0.9 μmol/L,dNTP 0.12 mmol/L,M2+1.5 mmol/L,Taq DNA聚閤酶0.5 U,引物835號的最適退火溫度為50.8℃.結果錶明此反應體繫標記位點清晰、穩定、重複性好.
위진일보연구동충하초적유전다양성,시험채용개량적CTAB법제취고질량DNA모판,극복료동충하초중부함다당、단백、염류화색소적영향.건립병우화료동충하초ISSR-PCR최괄반응체계,즉재25μL체계중반응물적함량분별위:10×PCR Buffer 2.5μL,모판DNA20 ng.인물0.9 μmol/L,dNTP 0.12 mmol/L,M2+1.5 mmol/L,Taq DNA취합매0.5 U,인물835호적최괄퇴화온도위50.8℃.결과표명차반응체계표기위점청석、은정、중복성호.