中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2011年
3期
233-237,253
,共6页
结核分枝杆菌%katG基因/S315突变%异烟肼/耐药%基因芯片/检测
結覈分枝桿菌%katG基因/S315突變%異煙肼/耐藥%基因芯片/檢測
결핵분지간균%katG기인/S315돌변%이연정/내약%기인심편/검측
目的 了解结核分枝杆菌katG基因S315突变与异烟肼(isoniazid,INH)耐药相关性,建立快速简便的katG基因S315突变基因芯片检测方法.方法 采用二倍稀释法检测123株结核分枝杆菌临床分离菌株对INH的耐药性.PCR及测序确定上述结核分枝杆菌katG基因S315位点突变率及突变类型.根据PCR及测序结果,设计Cy3荧光标记探针并制备katG基因S315位点突变检测基因芯片.基因芯片检测结果与PCR及测序结果进行对比分析.结果 123株结核分枝杆菌临床菌株中,39.0%(48/123)菌株对INH敏感,61.0%(75/123)菌株对INH耐药.结核分枝杆菌H37Rv株及所有临床菌株均能扩增出katG基因片段.75株INH耐药菌株中,69.3%(52/75)菌株katG基因出现S315位突变,其中25株突变类型为S315N(AGC→AAC)、12株为S315T(AGC→ACC)、7株为S315I(AGC→ATC)、各有3株分别为S315T(AGC→CGC)和S315R(AGC→AGA)、2株为S315G(AGC→GGC).所制备的基因芯片对123株结核分枝杆菌katG基因S315野生型或突变型检测结果与PCR及测序结果完全一致.结论 结核分枝杆菌katG基因S315突变与INH耐药密切相关.本研究中制备的基因芯片可快速、简便、准确、敏感和特异地检测结核分枝杆菌katG基因S315突变及其类型.
目的 瞭解結覈分枝桿菌katG基因S315突變與異煙肼(isoniazid,INH)耐藥相關性,建立快速簡便的katG基因S315突變基因芯片檢測方法.方法 採用二倍稀釋法檢測123株結覈分枝桿菌臨床分離菌株對INH的耐藥性.PCR及測序確定上述結覈分枝桿菌katG基因S315位點突變率及突變類型.根據PCR及測序結果,設計Cy3熒光標記探針併製備katG基因S315位點突變檢測基因芯片.基因芯片檢測結果與PCR及測序結果進行對比分析.結果 123株結覈分枝桿菌臨床菌株中,39.0%(48/123)菌株對INH敏感,61.0%(75/123)菌株對INH耐藥.結覈分枝桿菌H37Rv株及所有臨床菌株均能擴增齣katG基因片段.75株INH耐藥菌株中,69.3%(52/75)菌株katG基因齣現S315位突變,其中25株突變類型為S315N(AGC→AAC)、12株為S315T(AGC→ACC)、7株為S315I(AGC→ATC)、各有3株分彆為S315T(AGC→CGC)和S315R(AGC→AGA)、2株為S315G(AGC→GGC).所製備的基因芯片對123株結覈分枝桿菌katG基因S315野生型或突變型檢測結果與PCR及測序結果完全一緻.結論 結覈分枝桿菌katG基因S315突變與INH耐藥密切相關.本研究中製備的基因芯片可快速、簡便、準確、敏感和特異地檢測結覈分枝桿菌katG基因S315突變及其類型.
목적 료해결핵분지간균katG기인S315돌변여이연정(isoniazid,INH)내약상관성,건립쾌속간편적katG기인S315돌변기인심편검측방법.방법 채용이배희석법검측123주결핵분지간균림상분리균주대INH적내약성.PCR급측서학정상술결핵분지간균katG기인S315위점돌변솔급돌변류형.근거PCR급측서결과,설계Cy3형광표기탐침병제비katG기인S315위점돌변검측기인심편.기인심편검측결과여PCR급측서결과진행대비분석.결과 123주결핵분지간균림상균주중,39.0%(48/123)균주대INH민감,61.0%(75/123)균주대INH내약.결핵분지간균H37Rv주급소유림상균주균능확증출katG기인편단.75주INH내약균주중,69.3%(52/75)균주katG기인출현S315위돌변,기중25주돌변류형위S315N(AGC→AAC)、12주위S315T(AGC→ACC)、7주위S315I(AGC→ATC)、각유3주분별위S315T(AGC→CGC)화S315R(AGC→AGA)、2주위S315G(AGC→GGC).소제비적기인심편대123주결핵분지간균katG기인S315야생형혹돌변형검측결과여PCR급측서결과완전일치.결론 결핵분지간균katG기인S315돌변여INH내약밀절상관.본연구중제비적기인심편가쾌속、간편、준학、민감화특이지검측결핵분지간균katG기인S315돌변급기류형.