CAJ | 학술논문

多种不同类型的白血病均存在持续活化的核转录因子κB(NF-κB),而抑制NF-κB活化诱导细胞凋亡有可能成为治疗白血病新的方法.本研究探讨修饰的5型腺病毒载体即Ad5F35嵌合腺病毒载体(Ad5F35 Vec)介导的突变性IκBα(IκBαDN)对白血病细胞调亡的作用.将携带缺失5'端1-70个氨基酸编码序列的人IκBαAd5F35-IκBαDN Vec转染HL-60)细胞.采用流式细胞术、DNA结合试验、实时定量PCR和Westem blot技术分别检测细胞凋亡、NF-κB DNA结合活性、IκBα,cIAP-2和xLAP的表达.结果显示,转染48小时后,转染Ad5F35-IκBαDN Vec细胞、空白载体Ad5F35-EGFP Vec细胞以及未转染细胞的凋亡率分别为(22.53±2.999)%,(6.08±2.464)%和(4.86±1.366)%,其差异具有显著意义(Ad5F35-IκBαDN Vec vs未转染:p<0.001;Ad5F35-IκBαDN Vec vs Ad5F35-EGFP Vec;p<0.001,p<0.002).同时,NF-κB DNA结合活性降低,IκBα表达增加,但cIAP-2和xIAP mRNA的表达降低.结论:Ad5F35 Ve'能够有效介导IκBαDN cDNA在HL-60细胞的表达,IκBαDN可抑制HL-60细胞NF-κB DNA结合活性并诱导其凋亡.
다충불동류형적백혈병균존재지속활화적핵전록인자κB(NF-κB),이억제NF-κB활화유도세포조망유가능성위치료백혈병신적방법.본연구탐토수식적5형선병독재체즉Ad5F35감합선병독재체(Ad5F35 Vec)개도적돌변성IκBα(IκBαDN)대백혈병세포조망적작용.장휴대결실5'단1-70개안기산편마서렬적인IκBαAd5F35-IκBαDN Vec전염HL-60)세포.채용류식세포술、DNA결합시험、실시정량PCR화Westem blot기술분별검측세포조망、NF-κB DNA결합활성、IκBα,cIAP-2화xLAP적표체.결과현시,전염48소시후,전염Ad5F35-IκBαDN Vec세포、공백재체Ad5F35-EGFP Vec세포이급미전염세포적조망솔분별위(22.53±2.999)%,(6.08±2.464)%화(4.86±1.366)%,기차이구유현저의의(Ad5F35-IκBαDN Vec vs미전염:p<0.001;Ad5F35-IκBαDN Vec vs Ad5F35-EGFP Vec;p<0.001,p<0.002).동시,NF-κB DNA결합활성강저,IκBα표체증가,단cIAP-2화xIAP mRNA적표체강저.결론:Ad5F35 Ve'능구유효개도IκBαDN cDNA재HL-60세포적표체,IκBαDN가억제HL-60세포NF-κB DNA결합활성병유도기조망.