畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2011年
10期
1402-1408
,共7页
周云朵%康真玉%陈月平%史小娜%陈建国%赵雅心%刘正飞
週雲朵%康真玉%陳月平%史小娜%陳建國%趙雅心%劉正飛
주운타%강진옥%진월평%사소나%진건국%조아심%류정비
犬细小病毒%分离%电镜%动物回归试验
犬細小病毒%分離%電鏡%動物迴歸試驗
견세소병독%분리%전경%동물회귀시험
本研究旨在获得华中地区的犬细小病毒分离株并对其基因型分型、生物学特性及致病力进行探讨.从武汉部分宠物医院采集胶体金初检阳性的14份可疑病料,用猫肾细胞(F81)进行病毒分离.根据犬细小病毒2型(CPV-2)保守的VP2,先后设计2对引物,进行PCR扩增.在细胞上对其进行空斑纯化,进行一步法生长曲线测定,并进行电镜观察.最后对这5株病毒都进行动物回归试验.细胞传代结果表明得到5株细小病毒.PCR扩增结果表明获得390和583 bp 2个片段.将2个片段测序的结果与GenBank发布的CPV-2比对,表明所获得的5株病毒中,有4株属于2a型,1株属于2b型.空斑纯化及生长曲线绘制结果表明分离毒株增殖滴度可达105.5PFU·mL-1.电镜观察结果表明,感染细胞的线粒体肿胀.动物试验结果表明犬都能表现不同程度的发病状况,大体解剖发现肠管有坏死、心肌变薄.将病变的心脏制作切片观察,结果表明心肌细胞变性、坏死.本研究结果为进一步研究CPV-2的分子生物学和分子致病机理奠定了基础.
本研究旨在穫得華中地區的犬細小病毒分離株併對其基因型分型、生物學特性及緻病力進行探討.從武漢部分寵物醫院採集膠體金初檢暘性的14份可疑病料,用貓腎細胞(F81)進行病毒分離.根據犬細小病毒2型(CPV-2)保守的VP2,先後設計2對引物,進行PCR擴增.在細胞上對其進行空斑純化,進行一步法生長麯線測定,併進行電鏡觀察.最後對這5株病毒都進行動物迴歸試驗.細胞傳代結果錶明得到5株細小病毒.PCR擴增結果錶明穫得390和583 bp 2箇片段.將2箇片段測序的結果與GenBank髮佈的CPV-2比對,錶明所穫得的5株病毒中,有4株屬于2a型,1株屬于2b型.空斑純化及生長麯線繪製結果錶明分離毒株增殖滴度可達105.5PFU·mL-1.電鏡觀察結果錶明,感染細胞的線粒體腫脹.動物試驗結果錶明犬都能錶現不同程度的髮病狀況,大體解剖髮現腸管有壞死、心肌變薄.將病變的心髒製作切片觀察,結果錶明心肌細胞變性、壞死.本研究結果為進一步研究CPV-2的分子生物學和分子緻病機理奠定瞭基礎.
본연구지재획득화중지구적견세소병독분리주병대기기인형분형、생물학특성급치병력진행탐토.종무한부분총물의원채집효체금초검양성적14빈가의병료,용묘신세포(F81)진행병독분리.근거견세소병독2형(CPV-2)보수적VP2,선후설계2대인물,진행PCR확증.재세포상대기진행공반순화,진행일보법생장곡선측정,병진행전경관찰.최후대저5주병독도진행동물회귀시험.세포전대결과표명득도5주세소병독.PCR확증결과표명획득390화583 bp 2개편단.장2개편단측서적결과여GenBank발포적CPV-2비대,표명소획득적5주병독중,유4주속우2a형,1주속우2b형.공반순화급생장곡선회제결과표명분리독주증식적도가체105.5PFU·mL-1.전경관찰결과표명,감염세포적선립체종창.동물시험결과표명견도능표현불동정도적발병상황,대체해부발현장관유배사、심기변박.장병변적심장제작절편관찰,결과표명심기세포변성、배사.본연구결과위진일보연구CPV-2적분자생물학화분자치병궤리전정료기출.
