组织工程与重建外科杂志
組織工程與重建外科雜誌
조직공정여중건외과잡지
JOURNAL OF TISSUE ENGINEERING AND RECONSTRUCTIVE SURGERY
2012年
1期
1-5
,共5页
丁金萍%孙恒赟%陈谨君%张文杰%刘伟%曹谊林%周广东
丁金萍%孫恆赟%陳謹君%張文傑%劉偉%曹誼林%週廣東
정금평%손항빈%진근군%장문걸%류위%조의림%주엄동
CD204(巨噬细胞清道夫受体)%脂肪组织来源干细胞%软骨潜能%细胞分选
CD204(巨噬細胞清道伕受體)%脂肪組織來源榦細胞%軟骨潛能%細胞分選
CD204(거서세포청도부수체)%지방조직래원간세포%연골잠능%세포분선
目的 比较CD204+和CD204-两种人脂肪来源细胞的干细胞特性和体外诱导成软骨的能力.方法 分离培养人脂肪来源细胞并进行流式细胞分选,分别获得CD204+和CD204-两种细胞.将这两种细胞培养扩增至第2代,观察其形态学特点;成脂、成骨定向诱导分化,油红O染色、茜素红染色定性;同时将两种细胞进行pellet成软骨诱导分化,比较体外诱导成软骨的能力,并以HE、Safranin O和Ⅱ型胶原免疫组化染色等进行鉴定.结果 经流式细胞分选,脂肪来源细胞中CD204表达阳性率约为10%.分选后的CD204+和CD204-细胞均呈成纤维细胞样贴壁生长,但CD204-细胞具有更强的增殖能力.成脂诱导10d后,两组细胞油红O染色均可见胞浆内有大量红染脂滴,但 CD204+细胞具有更强的成脂潜能.成骨诱导2周后,两组细胞茜素红染色均可见钙结节红染,而CD204-细胞具有更强的成骨潜能.同时,细胞pellet成软骨诱导4周后,大体观可见CD204-细胞组pellet形成白色透明样软骨成分,而CD204+细胞组pellet外观微黄.HE和Ⅱ型胶原免疫组化染色均显示CD204-组pellet可见成熟软骨陷窝形成,SafraninO染色显示CD204-组软骨特异性细胞外基质沉积;而CD204+细胞组pellet则呈纤维化改变.结论 脂肪组织来源的CD204-细胞具有干细胞的生物学特点,且有良好的成软骨潜能,可以成为软骨组织工程良好的种子细胞来源.
目的 比較CD204+和CD204-兩種人脂肪來源細胞的榦細胞特性和體外誘導成軟骨的能力.方法 分離培養人脂肪來源細胞併進行流式細胞分選,分彆穫得CD204+和CD204-兩種細胞.將這兩種細胞培養擴增至第2代,觀察其形態學特點;成脂、成骨定嚮誘導分化,油紅O染色、茜素紅染色定性;同時將兩種細胞進行pellet成軟骨誘導分化,比較體外誘導成軟骨的能力,併以HE、Safranin O和Ⅱ型膠原免疫組化染色等進行鑒定.結果 經流式細胞分選,脂肪來源細胞中CD204錶達暘性率約為10%.分選後的CD204+和CD204-細胞均呈成纖維細胞樣貼壁生長,但CD204-細胞具有更彊的增殖能力.成脂誘導10d後,兩組細胞油紅O染色均可見胞漿內有大量紅染脂滴,但 CD204+細胞具有更彊的成脂潛能.成骨誘導2週後,兩組細胞茜素紅染色均可見鈣結節紅染,而CD204-細胞具有更彊的成骨潛能.同時,細胞pellet成軟骨誘導4週後,大體觀可見CD204-細胞組pellet形成白色透明樣軟骨成分,而CD204+細胞組pellet外觀微黃.HE和Ⅱ型膠原免疫組化染色均顯示CD204-組pellet可見成熟軟骨陷窩形成,SafraninO染色顯示CD204-組軟骨特異性細胞外基質沉積;而CD204+細胞組pellet則呈纖維化改變.結論 脂肪組織來源的CD204-細胞具有榦細胞的生物學特點,且有良好的成軟骨潛能,可以成為軟骨組織工程良好的種子細胞來源.
목적 비교CD204+화CD204-량충인지방래원세포적간세포특성화체외유도성연골적능력.방법 분리배양인지방래원세포병진행류식세포분선,분별획득CD204+화CD204-량충세포.장저량충세포배양확증지제2대,관찰기형태학특점;성지、성골정향유도분화,유홍O염색、천소홍염색정성;동시장량충세포진행pellet성연골유도분화,비교체외유도성연골적능력,병이HE、Safranin O화Ⅱ형효원면역조화염색등진행감정.결과 경류식세포분선,지방래원세포중CD204표체양성솔약위10%.분선후적CD204+화CD204-세포균정성섬유세포양첩벽생장,단CD204-세포구유경강적증식능력.성지유도10d후,량조세포유홍O염색균가견포장내유대량홍염지적,단 CD204+세포구유경강적성지잠능.성골유도2주후,량조세포천소홍염색균가견개결절홍염,이CD204-세포구유경강적성골잠능.동시,세포pellet성연골유도4주후,대체관가견CD204-세포조pellet형성백색투명양연골성분,이CD204+세포조pellet외관미황.HE화Ⅱ형효원면역조화염색균현시CD204-조pellet가견성숙연골함와형성,SafraninO염색현시CD204-조연골특이성세포외기질침적;이CD204+세포조pellet칙정섬유화개변.결론 지방조직래원적CD204-세포구유간세포적생물학특점,차유량호적성연골잠능,가이성위연골조직공정량호적충자세포래원.