同济大学学报(医学版)
同濟大學學報(醫學版)
동제대학학보(의학판)
JOURNAL OF TONGJI UNIVERSITY (MEDICAL SCIENCE)
2012年
4期
26-31
,共6页
王明丽%李智%何丽梅%徐晋豫%许闪闪
王明麗%李智%何麗梅%徐晉豫%許閃閃
왕명려%리지%하려매%서진예%허섬섬
肾肿瘤%YY1基因%RNA干扰%细胞增殖%侵袭
腎腫瘤%YY1基因%RNA榦擾%細胞增殖%侵襲
신종류%YY1기인%RNA간우%세포증식%침습
目的 探讨YY1基因在肾癌组织中表达及小干扰RNA( siRNA)对人肾癌786-O细胞增殖和侵袭的影响.方法 以Real-Time PCR检测转录因子YY1在20对肾癌及癌旁组织中的表达;采用脂质体转染法将siRNA转染入人肾癌786-O细胞中,Real-Time PCR和Western印迹法检测YY1转染效率;MTT和平板克隆形成实验检测细胞增殖变化;流式细胞术检测细胞周期;Transwell及Matrigel检测细胞侵袭能力,Real-Time PCR检测基质金属蛋白酶MMP9及钙黏附蛋白E-cadherin mRNA表达水平.结果 与癌旁组织相比,20对癌组织中YY1 mRNA表达量显著增高(P<0.01).转染人肾癌786-O后,siRNA-YY1组细胞YY1mRNA的表达抑制率达66% (P<0.01),蛋白表达水平也明显低于siRNA-NC组.与NC组相比,siRNA-YY1组细胞增殖能力显著降低(P<0.01),细胞生长被阻滞在G0/G1期,细胞侵袭能力明显减弱(P<0.01).此外,与NC组相比,MMP9及E-cadherin mRNA水平有显著差异(P<0.01).结论 YY1在肾癌组织中高表达,靶向沉默YY1可以在体外显著抑制肿瘤细胞的生长和侵袭能力.YY1特异性siRNA作为一种治疗肿瘤的新途径值得进一步研究.
目的 探討YY1基因在腎癌組織中錶達及小榦擾RNA( siRNA)對人腎癌786-O細胞增殖和侵襲的影響.方法 以Real-Time PCR檢測轉錄因子YY1在20對腎癌及癌徬組織中的錶達;採用脂質體轉染法將siRNA轉染入人腎癌786-O細胞中,Real-Time PCR和Western印跡法檢測YY1轉染效率;MTT和平闆剋隆形成實驗檢測細胞增殖變化;流式細胞術檢測細胞週期;Transwell及Matrigel檢測細胞侵襲能力,Real-Time PCR檢測基質金屬蛋白酶MMP9及鈣黏附蛋白E-cadherin mRNA錶達水平.結果 與癌徬組織相比,20對癌組織中YY1 mRNA錶達量顯著增高(P<0.01).轉染人腎癌786-O後,siRNA-YY1組細胞YY1mRNA的錶達抑製率達66% (P<0.01),蛋白錶達水平也明顯低于siRNA-NC組.與NC組相比,siRNA-YY1組細胞增殖能力顯著降低(P<0.01),細胞生長被阻滯在G0/G1期,細胞侵襲能力明顯減弱(P<0.01).此外,與NC組相比,MMP9及E-cadherin mRNA水平有顯著差異(P<0.01).結論 YY1在腎癌組織中高錶達,靶嚮沉默YY1可以在體外顯著抑製腫瘤細胞的生長和侵襲能力.YY1特異性siRNA作為一種治療腫瘤的新途徑值得進一步研究.
목적 탐토YY1기인재신암조직중표체급소간우RNA( siRNA)대인신암786-O세포증식화침습적영향.방법 이Real-Time PCR검측전록인자YY1재20대신암급암방조직중적표체;채용지질체전염법장siRNA전염입인신암786-O세포중,Real-Time PCR화Western인적법검측YY1전염효솔;MTT화평판극륭형성실험검측세포증식변화;류식세포술검측세포주기;Transwell급Matrigel검측세포침습능력,Real-Time PCR검측기질금속단백매MMP9급개점부단백E-cadherin mRNA표체수평.결과 여암방조직상비,20대암조직중YY1 mRNA표체량현저증고(P<0.01).전염인신암786-O후,siRNA-YY1조세포YY1mRNA적표체억제솔체66% (P<0.01),단백표체수평야명현저우siRNA-NC조.여NC조상비,siRNA-YY1조세포증식능력현저강저(P<0.01),세포생장피조체재G0/G1기,세포침습능력명현감약(P<0.01).차외,여NC조상비,MMP9급E-cadherin mRNA수평유현저차이(P<0.01).결론 YY1재신암조직중고표체,파향침묵YY1가이재체외현저억제종류세포적생장화침습능력.YY1특이성siRNA작위일충치료종류적신도경치득진일보연구.