中华医学杂志
中華醫學雜誌
중화의학잡지
National Medical Journal of China
2004年
21期
1827-1831
,共5页
石长清%李正东%张群华%倪泉兴%金忱%张妞%宋宁
石長清%李正東%張群華%倪泉興%金忱%張妞%宋寧
석장청%리정동%장군화%예천흥%금침%장뉴%송저
Kringle 5%胰腺肿瘤%基因疗法
Kringle 5%胰腺腫瘤%基因療法
Kringle 5%이선종류%기인요법
目的将人血纤溶酶原Kringle 5基因导入人胰腺癌PC3细胞,观察其对人胰腺癌PC3细胞系的基因治疗作用.方法将外源性Kringle 5通过脂质体转染法导入人胰腺癌PC3细胞,筛选阳性克隆,同时设空质粒组及PC3细胞为对照.采用RT-PCR、免疫组织化学、MTT、电镜、流式细胞术等方法,鉴定及检测转染前后细胞超微结构、细胞周期及Kringle 5蛋白表达情况,并用血管内皮细胞增殖实验及裸鼠接种检测目的胰腺癌细胞株表达的Kringle 5蛋白抑制血管内皮细胞生长的活性及裸鼠移植瘤生长情况.结果人血纤溶酶原Kringle 5基因及蛋白水平在胰腺癌PC3细胞系均可以稳定表达,能抑制ECV304血管内皮细胞生长及具有抑制裸鼠移植瘤生长的作用.结论成功转染人Kringle 5基因的人胰腺癌PC3细胞可稳定表达Kringle 5蛋白,且具有抗血管内皮细胞增殖活性的良好作用,为进一步进行体内抗血管生成基因治疗奠定了基础.
目的將人血纖溶酶原Kringle 5基因導入人胰腺癌PC3細胞,觀察其對人胰腺癌PC3細胞繫的基因治療作用.方法將外源性Kringle 5通過脂質體轉染法導入人胰腺癌PC3細胞,篩選暘性剋隆,同時設空質粒組及PC3細胞為對照.採用RT-PCR、免疫組織化學、MTT、電鏡、流式細胞術等方法,鑒定及檢測轉染前後細胞超微結構、細胞週期及Kringle 5蛋白錶達情況,併用血管內皮細胞增殖實驗及裸鼠接種檢測目的胰腺癌細胞株錶達的Kringle 5蛋白抑製血管內皮細胞生長的活性及裸鼠移植瘤生長情況.結果人血纖溶酶原Kringle 5基因及蛋白水平在胰腺癌PC3細胞繫均可以穩定錶達,能抑製ECV304血管內皮細胞生長及具有抑製裸鼠移植瘤生長的作用.結論成功轉染人Kringle 5基因的人胰腺癌PC3細胞可穩定錶達Kringle 5蛋白,且具有抗血管內皮細胞增殖活性的良好作用,為進一步進行體內抗血管生成基因治療奠定瞭基礎.
목적장인혈섬용매원Kringle 5기인도입인이선암PC3세포,관찰기대인이선암PC3세포계적기인치료작용.방법장외원성Kringle 5통과지질체전염법도입인이선암PC3세포,사선양성극륭,동시설공질립조급PC3세포위대조.채용RT-PCR、면역조직화학、MTT、전경、류식세포술등방법,감정급검측전염전후세포초미결구、세포주기급Kringle 5단백표체정황,병용혈관내피세포증식실험급라서접충검측목적이선암세포주표체적Kringle 5단백억제혈관내피세포생장적활성급라서이식류생장정황.결과인혈섬용매원Kringle 5기인급단백수평재이선암PC3세포계균가이은정표체,능억제ECV304혈관내피세포생장급구유억제라서이식류생장적작용.결론성공전염인Kringle 5기인적인이선암PC3세포가은정표체Kringle 5단백,차구유항혈관내피세포증식활성적량호작용,위진일보진행체내항혈관생성기인치료전정료기출.
