生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2010年
1期
1-6
,共6页
王立良%王淼%王浩%张玉建%刘勇%邵一鸣
王立良%王淼%王浩%張玉建%劉勇%邵一鳴
왕립량%왕묘%왕호%장옥건%류용%소일명
细菌人工染色体%同源重组%条件型基因敲除%打靶载体%Flox小鼠
細菌人工染色體%同源重組%條件型基因敲除%打靶載體%Flox小鼠
세균인공염색체%동원중조%조건형기인고제%타파재체%Flox소서
目的:探索通过细菌人工染色体(BAC)同源重组系统构建条件基因敲除载体的高效率方法,提高条件基因敲除小鼠(Flox小鼠)的构建效率.方法:利用作者自己构建的噬菌体重组酶系统,通过BAC同源重组进行条件型基因敲除载体构建工作.首先通过亚克隆构建了一系列载体含有同源臂的靶向质粒,线性化后,打靶片段经电穿孔法转入大肠杆菌内,与相应的BAC同源重组,再经过三步同源重组和一步位点特异性重组,构建小鼠条件型基因敲除载体.结果:高效率构建了小鼠基因的最终条件基因敲除载体.结论:通过BAC同源重组高效构建条件基因敲除载体,为条件基因敲除载体的构建提供了全新思路,并为FLox小鼠的建立,及相应基因在发育、生理、致病机制等方面的功能研究奠定了基础.
目的:探索通過細菌人工染色體(BAC)同源重組繫統構建條件基因敲除載體的高效率方法,提高條件基因敲除小鼠(Flox小鼠)的構建效率.方法:利用作者自己構建的噬菌體重組酶繫統,通過BAC同源重組進行條件型基因敲除載體構建工作.首先通過亞剋隆構建瞭一繫列載體含有同源臂的靶嚮質粒,線性化後,打靶片段經電穿孔法轉入大腸桿菌內,與相應的BAC同源重組,再經過三步同源重組和一步位點特異性重組,構建小鼠條件型基因敲除載體.結果:高效率構建瞭小鼠基因的最終條件基因敲除載體.結論:通過BAC同源重組高效構建條件基因敲除載體,為條件基因敲除載體的構建提供瞭全新思路,併為FLox小鼠的建立,及相應基因在髮育、生理、緻病機製等方麵的功能研究奠定瞭基礎.
목적:탐색통과세균인공염색체(BAC)동원중조계통구건조건기인고제재체적고효솔방법,제고조건기인고제소서(Flox소서)적구건효솔.방법:이용작자자기구건적서균체중조매계통,통과BAC동원중조진행조건형기인고제재체구건공작.수선통과아극륭구건료일계렬재체함유동원비적파향질립,선성화후,타파편단경전천공법전입대장간균내,여상응적BAC동원중조,재경과삼보동원중조화일보위점특이성중조,구건소서조건형기인고제재체.결과:고효솔구건료소서기인적최종조건기인고제재체.결론:통과BAC동원중조고효구건조건기인고제재체,위조건기인고제재체적구건제공료전신사로,병위FLox소서적건립,급상응기인재발육、생리、치병궤제등방면적공능연구전정료기출.
