中国皮肤性病学杂志
中國皮膚性病學雜誌
중국피부성병학잡지
THE CHINESE JOURNAL OF DERMATOVENEREOLOGY
2007年
6期
337-339
,共3页
刘斌%沈柱%陈凌%刘玉峰%菅金龙
劉斌%瀋柱%陳凌%劉玉峰%菅金龍
류빈%침주%진릉%류옥봉%관금룡
毕赤酵母%壳三糖酶%真菌%几丁质
畢赤酵母%殼三糖酶%真菌%幾丁質
필적효모%각삼당매%진균%궤정질
目的 用巴斯德毕赤酵母系统表达人壳三糖酶,并进行亲和层析纯化,获得具有天然构象的人壳三糖酶.方法 从pUC19-Chit融合载体中扩增编码人壳三糖酶基因,并将其克隆入真核表达载体pPIC9K,以电穿孔法转化酵母GS115.用MD平板筛选重组子,G418筛选高拷贝转化子,经甲醇诱导表达后,几丁质亲和层析法对表达上清进行纯化,并进行SDS-PAGE分析.结果 构建了人壳三糖酶融合真核表达载体pPIC9K-Chit.SDS-PAGE显示人壳三糖酶分子量约为50 000 Da,表达量约为24 mg/L,纯度为97%.结论 人壳三糖酶在毕赤酵母中的成功表达和具有天然构象的人壳三糖酶获得为进一步研究其抗真菌作用提供了物质基础.
目的 用巴斯德畢赤酵母繫統錶達人殼三糖酶,併進行親和層析純化,穫得具有天然構象的人殼三糖酶.方法 從pUC19-Chit融閤載體中擴增編碼人殼三糖酶基因,併將其剋隆入真覈錶達載體pPIC9K,以電穿孔法轉化酵母GS115.用MD平闆篩選重組子,G418篩選高拷貝轉化子,經甲醇誘導錶達後,幾丁質親和層析法對錶達上清進行純化,併進行SDS-PAGE分析.結果 構建瞭人殼三糖酶融閤真覈錶達載體pPIC9K-Chit.SDS-PAGE顯示人殼三糖酶分子量約為50 000 Da,錶達量約為24 mg/L,純度為97%.結論 人殼三糖酶在畢赤酵母中的成功錶達和具有天然構象的人殼三糖酶穫得為進一步研究其抗真菌作用提供瞭物質基礎.
목적 용파사덕필적효모계통표체인각삼당매,병진행친화층석순화,획득구유천연구상적인각삼당매.방법 종pUC19-Chit융합재체중확증편마인각삼당매기인,병장기극륭입진핵표체재체pPIC9K,이전천공법전화효모GS115.용MD평판사선중조자,G418사선고고패전화자,경갑순유도표체후,궤정질친화층석법대표체상청진행순화,병진행SDS-PAGE분석.결과 구건료인각삼당매융합진핵표체재체pPIC9K-Chit.SDS-PAGE현시인각삼당매분자량약위50 000 Da,표체량약위24 mg/L,순도위97%.결론 인각삼당매재필적효모중적성공표체화구유천연구상적인각삼당매획득위진일보연구기항진균작용제공료물질기출.
