激光生物学报
激光生物學報
격광생물학보
ACTA LASER BIOLOGY SINICA
2012年
3期
252-256
,共5页
黄婷%雷旻音%朱玲%刘腾%江志钢%吴秀山%邓云
黃婷%雷旻音%硃玲%劉騰%江誌鋼%吳秀山%鄧雲
황정%뢰민음%주령%류등%강지강%오수산%산운
Kruppel%融合蛋白%果蝇%多克隆抗体
Kruppel%融閤蛋白%果蠅%多剋隆抗體
Kruppel%융합단백%과승%다극륭항체
Kruppel在果蝇发育过程中起着重要的调控作用.为了进一步研究Kruppel的功能,需要制备Kruppel蛋白及其抗体.对已有的Kruppel序列进行分析,选取适当区域进行引物设计,从果蝇心脏cDNA文库中PCR扩增得到Kruppel部分编码区序列,并其连接到pET-28a载体上.将重组质粒(pET-28 a-Kruppel)转化rosetta受体菌,通过IPTG(Isopropyl β-D-thiogalactoside)诱导表达融合蛋白,用镍柱进行亲和纯化.将纯化得到的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,并用Western blot检测抗体的效价.
Kruppel在果蠅髮育過程中起著重要的調控作用.為瞭進一步研究Kruppel的功能,需要製備Kruppel蛋白及其抗體.對已有的Kruppel序列進行分析,選取適噹區域進行引物設計,從果蠅心髒cDNA文庫中PCR擴增得到Kruppel部分編碼區序列,併其連接到pET-28a載體上.將重組質粒(pET-28 a-Kruppel)轉化rosetta受體菌,通過IPTG(Isopropyl β-D-thiogalactoside)誘導錶達融閤蛋白,用鎳柱進行親和純化.將純化得到的融閤蛋白免疫新西蘭大白兔製備多剋隆抗體,併用Western blot檢測抗體的效價.
Kruppel재과승발육과정중기착중요적조공작용.위료진일보연구Kruppel적공능,수요제비Kruppel단백급기항체.대이유적Kruppel서렬진행분석,선취괄당구역진행인물설계,종과승심장cDNA문고중PCR확증득도Kruppel부분편마구서렬,병기련접도pET-28a재체상.장중조질립(pET-28 a-Kruppel)전화rosetta수체균,통과IPTG(Isopropyl β-D-thiogalactoside)유도표체융합단백,용얼주진행친화순화.장순화득도적융합단백면역신서란대백토제비다극륭항체,병용Western blot검측항체적효개.
