中华神经科杂志
中華神經科雜誌
중화신경과잡지
Chinese Journal of Neurology
2006年
7期
477-480
,共4页
黄天文%陈晓春%张静%朱元贵%宋锦秋%沈杰%林智颖%陈丽敏
黃天文%陳曉春%張靜%硃元貴%宋錦鞦%瀋傑%林智穎%陳麗敏
황천문%진효춘%장정%주원귀%송금추%침걸%림지영%진려민
淀粉样β蛋白%卡配因%tau蛋白质类%细胞骨架%磷酰化
澱粉樣β蛋白%卡配因%tau蛋白質類%細胞骨架%燐酰化
정분양β단백%잡배인%tau단백질류%세포골가%린선화
目的 探讨凝聚态β淀粉样蛋白25-35片段(Aβ25-35)对胎鼠皮质神经元中性钙蛋白酶-细胞周期依赖性蛋白激酶5(calpain-CDK5)通路的影响及其对tau蛋白的过度磷酸化和骨架稳定性的影响.方法 用荧光酶标仪测定荧光强度来反映calpain活性;用Western-blot和(或)免疫细胞化学检测CDK5的激活蛋白p25/p35的蛋白水平和tau蛋白Thr205/Ser404位点磷酸化情况来体现CDK5活性;用电镜技术观察微管结构的变化来显示细胞骨架的改变情况.结果 20μmol/L的凝聚态Aβ25-35作用于皮质神经元12 h后,检测反映calpain活性的荧光强度(每微克蛋白荧光强度)高达680.25±37.77,与空白对照组167.25±11.67相比,差异有统计学意义(P＜0.05);对CDK5有活化作用的p25蛋白水平比空白对照组升高(2.07±0.20)倍,差异也有统计学意义(P＜0.05);CDK5的作用底物tau蛋白Thr205和Ser404位点磷酸化程度也显著增加,分别比空白对照组升高(1.80±0.27)和(1.83±0.14)倍,差异均有统计学意义(P＜0.05);同时出现神经元微管骨架排列紊乱.结论 凝聚态Aβ25-35通过活化皮质神经元的calpain,使p35降解p25来激活CDK5,促使tau蛋白过度磷酸化,破坏了微管骨架的稳定性.
目的 探討凝聚態β澱粉樣蛋白25-35片段(Aβ25-35)對胎鼠皮質神經元中性鈣蛋白酶-細胞週期依賴性蛋白激酶5(calpain-CDK5)通路的影響及其對tau蛋白的過度燐痠化和骨架穩定性的影響.方法 用熒光酶標儀測定熒光彊度來反映calpain活性;用Western-blot和(或)免疫細胞化學檢測CDK5的激活蛋白p25/p35的蛋白水平和tau蛋白Thr205/Ser404位點燐痠化情況來體現CDK5活性;用電鏡技術觀察微管結構的變化來顯示細胞骨架的改變情況.結果 20μmol/L的凝聚態Aβ25-35作用于皮質神經元12 h後,檢測反映calpain活性的熒光彊度(每微剋蛋白熒光彊度)高達680.25±37.77,與空白對照組167.25±11.67相比,差異有統計學意義(P＜0.05);對CDK5有活化作用的p25蛋白水平比空白對照組升高(2.07±0.20)倍,差異也有統計學意義(P＜0.05);CDK5的作用底物tau蛋白Thr205和Ser404位點燐痠化程度也顯著增加,分彆比空白對照組升高(1.80±0.27)和(1.83±0.14)倍,差異均有統計學意義(P＜0.05);同時齣現神經元微管骨架排列紊亂.結論 凝聚態Aβ25-35通過活化皮質神經元的calpain,使p35降解p25來激活CDK5,促使tau蛋白過度燐痠化,破壞瞭微管骨架的穩定性.
목적 탐토응취태β정분양단백25-35편단(Aβ25-35)대태서피질신경원중성개단백매-세포주기의뢰성단백격매5(calpain-CDK5)통로적영향급기대tau단백적과도린산화화골가은정성적영향.방법 용형광매표의측정형광강도래반영calpain활성;용Western-blot화(혹)면역세포화학검측CDK5적격활단백p25/p35적단백수평화tau단백Thr205/Ser404위점린산화정황래체현CDK5활성;용전경기술관찰미관결구적변화래현시세포골가적개변정황.결과 20μmol/L적응취태Aβ25-35작용우피질신경원12 h후,검측반영calpain활성적형광강도(매미극단백형광강도)고체680.25±37.77,여공백대조조167.25±11.67상비,차이유통계학의의(P＜0.05);대CDK5유활화작용적p25단백수평비공백대조조승고(2.07±0.20)배,차이야유통계학의의(P＜0.05);CDK5적작용저물tau단백Thr205화Ser404위점린산화정도야현저증가,분별비공백대조조승고(1.80±0.27)화(1.83±0.14)배,차이균유통계학의의(P＜0.05);동시출현신경원미관골가배렬문란.결론 응취태Aβ25-35통과활화피질신경원적calpain,사p35강해p25래격활CDK5,촉사tau단백과도린산화,파배료미관골가적은정성.
