中国神经精神疾病杂志
中國神經精神疾病雜誌
중국신경정신질병잡지
CHINESE JOURNAL OF NERVOUS AND MENTAL DISEASES
2006年
3期
224-227
,共4页
胡锦%王元元%董万利%蒋觉安%金由辛
鬍錦%王元元%董萬利%蔣覺安%金由辛
호금%왕원원%동만리%장각안%금유신
小干扰RNA%胰岛素样生长因子-1受体%胶质瘤%细胞凋亡
小榦擾RNA%胰島素樣生長因子-1受體%膠質瘤%細胞凋亡
소간우RNA%이도소양생장인자-1수체%효질류%세포조망
目的应用RNA干扰(RNAi)技术介导胶质瘤C6细胞株胰岛素生长因子-1受体(IGF-1R)基因下调诱导C6细胞凋亡的研究.方法体外化学合成靶向IGF-1R基因的小干扰RNA(siRNA),脂质体法将siRNA以不同浓度梯度转染C6细胞,设非特异的siRNA阳性对照组和未转染siRNA的阴性对照组:同时使用绿色荧光素标记的小干扰RNA (FITC-siRNA)转染细胞,荧光显微镜下观察siRNA转染效率;RT-PCR法半定量检测siRNA对IGF-1R基因表达的抑制作用;流式细胞术检测siRNA诱导细胞凋亡作用.结果荧光显微镜下荧光素标记的siRNA转染组可见细胞质内清晰的绿色荧光,脂质体Oligofectamine TM2000的转染效率接近100%;化学合成的siRNA 明显抑制IGF-1R mRNA的表达,各特异性siRNA不同浓度转染组IGF-1R mRNA表达水平可下调约10%～80%,流式细胞术检测细胞凋亡率转染组为22.47%±3.15%,与阳性对照组2.3%±0.9%和阴性对照组1.14%±0.79%比较有明显提高,而阳性、阴性对照组相比无明显差异.结论化学合成的靶向IGF-1R的siRNA可以明显下调IGF-1R基因的表达,胶质瘤细胞凋亡率明显上升,为进一步进行胶质瘤的基因治疗研究奠定基础.
目的應用RNA榦擾(RNAi)技術介導膠質瘤C6細胞株胰島素生長因子-1受體(IGF-1R)基因下調誘導C6細胞凋亡的研究.方法體外化學閤成靶嚮IGF-1R基因的小榦擾RNA(siRNA),脂質體法將siRNA以不同濃度梯度轉染C6細胞,設非特異的siRNA暘性對照組和未轉染siRNA的陰性對照組:同時使用綠色熒光素標記的小榦擾RNA (FITC-siRNA)轉染細胞,熒光顯微鏡下觀察siRNA轉染效率;RT-PCR法半定量檢測siRNA對IGF-1R基因錶達的抑製作用;流式細胞術檢測siRNA誘導細胞凋亡作用.結果熒光顯微鏡下熒光素標記的siRNA轉染組可見細胞質內清晰的綠色熒光,脂質體Oligofectamine TM2000的轉染效率接近100%;化學閤成的siRNA 明顯抑製IGF-1R mRNA的錶達,各特異性siRNA不同濃度轉染組IGF-1R mRNA錶達水平可下調約10%～80%,流式細胞術檢測細胞凋亡率轉染組為22.47%±3.15%,與暘性對照組2.3%±0.9%和陰性對照組1.14%±0.79%比較有明顯提高,而暘性、陰性對照組相比無明顯差異.結論化學閤成的靶嚮IGF-1R的siRNA可以明顯下調IGF-1R基因的錶達,膠質瘤細胞凋亡率明顯上升,為進一步進行膠質瘤的基因治療研究奠定基礎.
목적응용RNA간우(RNAi)기술개도효질류C6세포주이도소생장인자-1수체(IGF-1R)기인하조유도C6세포조망적연구.방법체외화학합성파향IGF-1R기인적소간우RNA(siRNA),지질체법장siRNA이불동농도제도전염C6세포,설비특이적siRNA양성대조조화미전염siRNA적음성대조조:동시사용록색형광소표기적소간우RNA (FITC-siRNA)전염세포,형광현미경하관찰siRNA전염효솔;RT-PCR법반정량검측siRNA대IGF-1R기인표체적억제작용;류식세포술검측siRNA유도세포조망작용.결과형광현미경하형광소표기적siRNA전염조가견세포질내청석적록색형광,지질체Oligofectamine TM2000적전염효솔접근100%;화학합성적siRNA 명현억제IGF-1R mRNA적표체,각특이성siRNA불동농도전염조IGF-1R mRNA표체수평가하조약10%～80%,류식세포술검측세포조망솔전염조위22.47%±3.15%,여양성대조조2.3%±0.9%화음성대조조1.14%±0.79%비교유명현제고,이양성、음성대조조상비무명현차이.결론화학합성적파향IGF-1R적siRNA가이명현하조IGF-1R기인적표체,효질류세포조망솔명현상승,위진일보진행효질류적기인치료연구전정기출.
