中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2010年
6期
494-497,502
,共5页
朱红%杨晓红%王亚平%唐恩洁
硃紅%楊曉紅%王亞平%唐恩潔
주홍%양효홍%왕아평%당은길
粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子%重组表达载体%细胞分化%K562
粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子%重組錶達載體%細胞分化%K562
립세포-거서세포집락자격인자%중조표체재체%세포분화%K562
目的:观察GM-CSF对髓系白血病细胞(K562)生长、分化的影响作用.方法:采用PCR、T-A克隆及基因定向克隆技术,将rhGM-CSF基因插入PcDNA3.1(+)空载体中,构建了PcDNA3.1-rhGM-CSF真核表达载体.经限制性内切酶消化和DNA测序鉴定确认,转染人K562髓系白血病细胞、72小时后采用细胞形态学检测、MTT试验、免疫组化技术观察和分析PcDNA3.1-rhGM-CSF在K562细胞中的表达及其影响该细胞生长与分化的作用.结果:①成功构建PcDNA3.1-rhGM-CSF真核细胞表达载体;②重组质粒PcDNA3.1-rhGM-CSF能在K562细胞中表达,并诱导K562细胞向单核细胞系、巨噬细胞系分化;③K562细胞增殖受到明显抑制.结论:成功构建了PcDNA3.1-rhGM-CSF真核细胞表达载体;转染K562细胞能向单核细胞系、巨噬细胞系分化.
目的:觀察GM-CSF對髓繫白血病細胞(K562)生長、分化的影響作用.方法:採用PCR、T-A剋隆及基因定嚮剋隆技術,將rhGM-CSF基因插入PcDNA3.1(+)空載體中,構建瞭PcDNA3.1-rhGM-CSF真覈錶達載體.經限製性內切酶消化和DNA測序鑒定確認,轉染人K562髓繫白血病細胞、72小時後採用細胞形態學檢測、MTT試驗、免疫組化技術觀察和分析PcDNA3.1-rhGM-CSF在K562細胞中的錶達及其影響該細胞生長與分化的作用.結果:①成功構建PcDNA3.1-rhGM-CSF真覈細胞錶達載體;②重組質粒PcDNA3.1-rhGM-CSF能在K562細胞中錶達,併誘導K562細胞嚮單覈細胞繫、巨噬細胞繫分化;③K562細胞增殖受到明顯抑製.結論:成功構建瞭PcDNA3.1-rhGM-CSF真覈細胞錶達載體;轉染K562細胞能嚮單覈細胞繫、巨噬細胞繫分化.
목적:관찰GM-CSF대수계백혈병세포(K562)생장、분화적영향작용.방법:채용PCR、T-A극륭급기인정향극륭기술,장rhGM-CSF기인삽입PcDNA3.1(+)공재체중,구건료PcDNA3.1-rhGM-CSF진핵표체재체.경한제성내절매소화화DNA측서감정학인,전염인K562수계백혈병세포、72소시후채용세포형태학검측、MTT시험、면역조화기술관찰화분석PcDNA3.1-rhGM-CSF재K562세포중적표체급기영향해세포생장여분화적작용.결과:①성공구건PcDNA3.1-rhGM-CSF진핵세포표체재체;②중조질립PcDNA3.1-rhGM-CSF능재K562세포중표체,병유도K562세포향단핵세포계、거서세포계분화;③K562세포증식수도명현억제.결론:성공구건료PcDNA3.1-rhGM-CSF진핵세포표체재체;전염K562세포능향단핵세포계、거서세포계분화.
