农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2010年
4期
815-821
,共7页
梅德圣%李云昌%陈玉峰%李英德%徐育松%胡琼
梅德聖%李雲昌%陳玉峰%李英德%徐育鬆%鬍瓊
매덕골%리운창%진옥봉%리영덕%서육송%호경
甘蓝型油菜%中油杂12%种子纯度%过氧化物酶同工酶%SSR标记
甘藍型油菜%中油雜12%種子純度%過氧化物酶同工酶%SSR標記
감람형유채%중유잡12%충자순도%과양화물매동공매%SSR표기
杂交种的纯度鉴定是油菜种子生产的重要环节.对甘蓝型油菜(Brassica napus L.)杂交品种中油杂12及其父母本的过氧化物酶同工酶分析结果显示,父本和杂种F1比母本多一条迁移率(Rf)为0.41的条带,该特征条带可用来进行粗放杂种纯度鉴定,但是难以鉴定出父本杂株.选用173对SSR引物对中油杂12的亲本进行扩增,筛选出了6对扩增效果好的引物,其扩增条带清晰且亲本间的差异能够重复,其中P052、P130、P131和P154这4对SSR引物在杂种F1中可分别扩增出父母本的特征条带.在同一反应体系中同时加入P131和P154两对引物,发现扩增产物带型是单独采用这两对引物分别扩增时产物带型的叠加.对于混杂程度较高的种子,采用P131+P154引物组合可以在工作量不变的条件下提高检测外来花粉的灵敏度,从而更加准确地鉴定中油杂12的种子纯度.对100份大田制种的中油杂12单株DNA分别用引物P131、P154以及引物组合P131+P154进行SSR分析,鉴定结果完全一致,并且与田间鉴定结果非常接近.
雜交種的純度鑒定是油菜種子生產的重要環節.對甘藍型油菜(Brassica napus L.)雜交品種中油雜12及其父母本的過氧化物酶同工酶分析結果顯示,父本和雜種F1比母本多一條遷移率(Rf)為0.41的條帶,該特徵條帶可用來進行粗放雜種純度鑒定,但是難以鑒定齣父本雜株.選用173對SSR引物對中油雜12的親本進行擴增,篩選齣瞭6對擴增效果好的引物,其擴增條帶清晰且親本間的差異能夠重複,其中P052、P130、P131和P154這4對SSR引物在雜種F1中可分彆擴增齣父母本的特徵條帶.在同一反應體繫中同時加入P131和P154兩對引物,髮現擴增產物帶型是單獨採用這兩對引物分彆擴增時產物帶型的疊加.對于混雜程度較高的種子,採用P131+P154引物組閤可以在工作量不變的條件下提高檢測外來花粉的靈敏度,從而更加準確地鑒定中油雜12的種子純度.對100份大田製種的中油雜12單株DNA分彆用引物P131、P154以及引物組閤P131+P154進行SSR分析,鑒定結果完全一緻,併且與田間鑒定結果非常接近.
잡교충적순도감정시유채충자생산적중요배절.대감람형유채(Brassica napus L.)잡교품충중유잡12급기부모본적과양화물매동공매분석결과현시,부본화잡충F1비모본다일조천이솔(Rf)위0.41적조대,해특정조대가용래진행조방잡충순도감정,단시난이감정출부본잡주.선용173대SSR인물대중유잡12적친본진행확증,사선출료6대확증효과호적인물,기확증조대청석차친본간적차이능구중복,기중P052、P130、P131화P154저4대SSR인물재잡충F1중가분별확증출부모본적특정조대.재동일반응체계중동시가입P131화P154량대인물,발현확증산물대형시단독채용저량대인물분별확증시산물대형적첩가.대우혼잡정도교고적충자,채용P131+P154인물조합가이재공작량불변적조건하제고검측외래화분적령민도,종이경가준학지감정중유잡12적충자순도.대100빈대전제충적중유잡12단주DNA분별용인물P131、P154이급인물조합P131+P154진행SSR분석,감정결과완전일치,병차여전간감정결과비상접근.
