国际检验医学杂志
國際檢驗醫學雜誌
국제검험의학잡지
INTERNATIONAL JOURNAL OF LABORATORY MEDICINE
2010年
12期
1365-1367
,共3页
裘宇容%芮勇宇%耿穗娜%苏斌%胡朝晖%刘洋敏%宣瑞红%赵利伟%朱庆义
裘宇容%芮勇宇%耿穗娜%囌斌%鬍朝暉%劉洋敏%宣瑞紅%趙利偉%硃慶義
구우용%예용우%경수나%소빈%호조휘%류양민%선서홍%조리위%주경의
军团病杆菌属%基因,rRNA%聚合酶链反应%痰
軍糰病桿菌屬%基因,rRNA%聚閤酶鏈反應%痰
군단병간균속%기인,rRNA%취합매련반응%담
目的 建立快速、特异、敏感的TaqMan探针荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法,用于检测军团菌16S RNA基因.方法 军团菌标准菌株购自美国标准菌种收藏所,临床痰标本取自南方医科大学南方医院257例病原不明肺炎住院患者.提取菌种DNA及临床痰标本DNA,通过对标准菌株及临床痰液标本DNA分别进行待考核试剂与16S rRNA PCR检测及测序,验证待考核试剂方法的敏感性、特异性. 结果荧光定量PCR检测灵敏度为10 cfu/mL,比16S rRNA定性PCR检测灵敏度381 cfu/mL高38倍.257例病原不明肺炎患者的临床痰标本细菌培养检出嗜肺军团菌血清型1型1例.待考核试剂和16S rRNA PCR方法检测阳性率分别为8.95%(23/257)和8.95%(23/257),其中2例不符合,1例待考核试剂阳性16S rRNA PCR方法阴性,另一例16S rRNA PCR方法阳性,待考核试剂阴性.二者总符合率为99.22%(255/257),其中阳性符合率为95.65%(22/23),阴性符合率为99.57%(233/234).结论 待考核试剂荧光定量PCR检测军团菌标准菌种敏感性强,特异性好,用于临床痰标本军团菌检测时假阳性率为4.35%,与16S rRNA PCR方法及测序比较具有较好的符合性和等效性.
目的 建立快速、特異、敏感的TaqMan探針熒光定量聚閤酶鏈反應(PCR)方法,用于檢測軍糰菌16S RNA基因.方法 軍糰菌標準菌株購自美國標準菌種收藏所,臨床痰標本取自南方醫科大學南方醫院257例病原不明肺炎住院患者.提取菌種DNA及臨床痰標本DNA,通過對標準菌株及臨床痰液標本DNA分彆進行待攷覈試劑與16S rRNA PCR檢測及測序,驗證待攷覈試劑方法的敏感性、特異性. 結果熒光定量PCR檢測靈敏度為10 cfu/mL,比16S rRNA定性PCR檢測靈敏度381 cfu/mL高38倍.257例病原不明肺炎患者的臨床痰標本細菌培養檢齣嗜肺軍糰菌血清型1型1例.待攷覈試劑和16S rRNA PCR方法檢測暘性率分彆為8.95%(23/257)和8.95%(23/257),其中2例不符閤,1例待攷覈試劑暘性16S rRNA PCR方法陰性,另一例16S rRNA PCR方法暘性,待攷覈試劑陰性.二者總符閤率為99.22%(255/257),其中暘性符閤率為95.65%(22/23),陰性符閤率為99.57%(233/234).結論 待攷覈試劑熒光定量PCR檢測軍糰菌標準菌種敏感性彊,特異性好,用于臨床痰標本軍糰菌檢測時假暘性率為4.35%,與16S rRNA PCR方法及測序比較具有較好的符閤性和等效性.
목적 건립쾌속、특이、민감적TaqMan탐침형광정량취합매련반응(PCR)방법,용우검측군단균16S RNA기인.방법 군단균표준균주구자미국표준균충수장소,림상담표본취자남방의과대학남방의원257례병원불명폐염주원환자.제취균충DNA급림상담표본DNA,통과대표준균주급림상담액표본DNA분별진행대고핵시제여16S rRNA PCR검측급측서,험증대고핵시제방법적민감성、특이성. 결과형광정량PCR검측령민도위10 cfu/mL,비16S rRNA정성PCR검측령민도381 cfu/mL고38배.257례병원불명폐염환자적림상담표본세균배양검출기폐군단균혈청형1형1례.대고핵시제화16S rRNA PCR방법검측양성솔분별위8.95%(23/257)화8.95%(23/257),기중2례불부합,1례대고핵시제양성16S rRNA PCR방법음성,령일례16S rRNA PCR방법양성,대고핵시제음성.이자총부합솔위99.22%(255/257),기중양성부합솔위95.65%(22/23),음성부합솔위99.57%(233/234).결론 대고핵시제형광정량PCR검측군단균표준균충민감성강,특이성호,용우림상담표본군단균검측시가양성솔위4.35%,여16S rRNA PCR방법급측서비교구유교호적부합성화등효성.
