检验医学
檢驗醫學
검험의학
LABORATORY MEDICINE
2011年
10期
667-671
,共5页
李道静%何晓东%李明%孙利%许维东%沈佐君
李道靜%何曉東%李明%孫利%許維東%瀋佐君
리도정%하효동%리명%손리%허유동%침좌군
氨甲蝶呤%氨甲蝶呤多聚谷氨酸链%毛细管电泳法%柱上样本堆积
氨甲蝶呤%氨甲蝶呤多聚穀氨痠鏈%毛細管電泳法%柱上樣本堆積
안갑접령%안갑접령다취곡안산련%모세관전영법%주상양본퇴적
目的 建立柱上堆积高效毛细管电泳法同时检测细胞内氨甲蝶呤(MTX)及其6种代谢产物氨甲蝶呤多聚谷氨酸链( MTXPG)的方法.方法 采用高效毛细管电泳技术,以75 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH值7.40)作为分离介质,用水和乙腈( V/V=1∶1)作溶剂重组残留样本的方法进行柱上样本堆积,0.5 psi压力进样,进样时间50 s,在分离电压28 kV、检测波长300 nm条件下对MTX和MXPG进行分离.在此基础上,检测细胞内MTX及其代谢产物MTXPG的含量.结果 通过不断改变分离缓冲液中异丙醇(5％、8％、10％,V/V)和羟丙基-β-环糊精( hp-β-CD)浓度(20、25、30 mmol/L),发现在含8％异丙醇、25 mmol/L hp-β-CD的缓冲液条件下,30 min内实现7种组分的完全分离.用水和乙腈(V/V=1∶1)作溶剂重组残留样本进行柱上样本堆积的方法可使检测灵敏度提高10倍.结论 建立柱上样本堆积高效毛细管电泳法可同时检测细胞内MTX及其代谢产物MTXPG.该方法具有高效、快速、简便、高灵敏度的特点.
目的 建立柱上堆積高效毛細管電泳法同時檢測細胞內氨甲蝶呤(MTX)及其6種代謝產物氨甲蝶呤多聚穀氨痠鏈( MTXPG)的方法.方法 採用高效毛細管電泳技術,以75 mmol/L燐痠鹽緩遲液(pH值7.40)作為分離介質,用水和乙腈( V/V=1∶1)作溶劑重組殘留樣本的方法進行柱上樣本堆積,0.5 psi壓力進樣,進樣時間50 s,在分離電壓28 kV、檢測波長300 nm條件下對MTX和MXPG進行分離.在此基礎上,檢測細胞內MTX及其代謝產物MTXPG的含量.結果 通過不斷改變分離緩遲液中異丙醇(5％、8％、10％,V/V)和羥丙基-β-環糊精( hp-β-CD)濃度(20、25、30 mmol/L),髮現在含8％異丙醇、25 mmol/L hp-β-CD的緩遲液條件下,30 min內實現7種組分的完全分離.用水和乙腈(V/V=1∶1)作溶劑重組殘留樣本進行柱上樣本堆積的方法可使檢測靈敏度提高10倍.結論 建立柱上樣本堆積高效毛細管電泳法可同時檢測細胞內MTX及其代謝產物MTXPG.該方法具有高效、快速、簡便、高靈敏度的特點.
목적 건립주상퇴적고효모세관전영법동시검측세포내안갑접령(MTX)급기6충대사산물안갑접령다취곡안산련( MTXPG)적방법.방법 채용고효모세관전영기술,이75 mmol/L린산염완충액(pH치7.40)작위분리개질,용수화을정( V/V=1∶1)작용제중조잔류양본적방법진행주상양본퇴적,0.5 psi압력진양,진양시간50 s,재분리전압28 kV、검측파장300 nm조건하대MTX화MXPG진행분리.재차기출상,검측세포내MTX급기대사산물MTXPG적함량.결과 통과불단개변분리완충액중이병순(5％、8％、10％,V/V)화간병기-β-배호정( hp-β-CD)농도(20、25、30 mmol/L),발현재함8％이병순、25 mmol/L hp-β-CD적완충액조건하,30 min내실현7충조분적완전분리.용수화을정(V/V=1∶1)작용제중조잔류양본진행주상양본퇴적적방법가사검측령민도제고10배.결론 건립주상양본퇴적고효모세관전영법가동시검측세포내MTX급기대사산물MTXPG.해방법구유고효、쾌속、간편、고령민도적특점.
