中国组织化学与细胞化学杂志
中國組織化學與細胞化學雜誌
중국조직화학여세포화학잡지
CHINESE JOURNAL OF HISTOCHEMISY AND CYTOCHEMISY
2012年
1期
84-88
,共5页
刘容容%王晔%李士勇%徐丽君
劉容容%王曄%李士勇%徐麗君
류용용%왕엽%리사용%서려군
骨髓间充质干细胞%缺氧%旁分泌%血管新生
骨髓間充質榦細胞%缺氧%徬分泌%血管新生
골수간충질간세포%결양%방분비%혈관신생
目的 探讨成人骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells BMSCs)在体外缺氧环境下对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖和血管形成能力的影响及其可能机制.方法密度梯度离心法收集分离成人骨髓血MSCs并进行体外培养扩增,传代至4代进行实验,流式细胞仪鉴定MSCs表面标志.BMSCs缺氧培养0h(对照组)、12h、24h和48h后,RT-PCR检测SDF-1和VEGF基因表达,ELISA法检测细胞上清液中SDF-1和VEGF蛋白含量.HUVECs传代培养后分成三组进行实验:对照组、BMSCsCMN-HUVECs组,BMSCsCMH-HUVECs组,MTT检测三组细胞增殖能力,体外血管形成实验分析三组细胞在Matrigel上管腔样结构形成情况.结果 (1) BMSCs呈旋涡状长梭形即纤维母细胞样生长;(2) 人BMSCs阳性表达CD29、CD44和CD90,而CD34、CD45和CD106为阴性;(3) BMSCs缺氧培养后SDF-1和VEGF在mRNA和蛋白水平表达均较常氧培养显著增高(P均<0.05);(4) BMSCsCMH明显提高HUVECs增殖能力(P<0.05),显著增加HUVECs在Matrigel上形成管腔样结构的能力(P<0.05).结论 人BMSCs在缺氧环境下通过旁分泌SDF-1和VEGF提高血管内皮细胞增殖和管腔样结构形成能力,促进血管新生.
目的 探討成人骨髓間充質榦細胞(bone marrow mesenchymal stem cells BMSCs)在體外缺氧環境下對人臍靜脈內皮細胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖和血管形成能力的影響及其可能機製.方法密度梯度離心法收集分離成人骨髓血MSCs併進行體外培養擴增,傳代至4代進行實驗,流式細胞儀鑒定MSCs錶麵標誌.BMSCs缺氧培養0h(對照組)、12h、24h和48h後,RT-PCR檢測SDF-1和VEGF基因錶達,ELISA法檢測細胞上清液中SDF-1和VEGF蛋白含量.HUVECs傳代培養後分成三組進行實驗:對照組、BMSCsCMN-HUVECs組,BMSCsCMH-HUVECs組,MTT檢測三組細胞增殖能力,體外血管形成實驗分析三組細胞在Matrigel上管腔樣結構形成情況.結果 (1) BMSCs呈鏇渦狀長梭形即纖維母細胞樣生長;(2) 人BMSCs暘性錶達CD29、CD44和CD90,而CD34、CD45和CD106為陰性;(3) BMSCs缺氧培養後SDF-1和VEGF在mRNA和蛋白水平錶達均較常氧培養顯著增高(P均<0.05);(4) BMSCsCMH明顯提高HUVECs增殖能力(P<0.05),顯著增加HUVECs在Matrigel上形成管腔樣結構的能力(P<0.05).結論 人BMSCs在缺氧環境下通過徬分泌SDF-1和VEGF提高血管內皮細胞增殖和管腔樣結構形成能力,促進血管新生.
목적 탐토성인골수간충질간세포(bone marrow mesenchymal stem cells BMSCs)재체외결양배경하대인제정맥내피세포(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)증식화혈관형성능력적영향급기가능궤제.방법밀도제도리심법수집분리성인골수혈MSCs병진행체외배양확증,전대지4대진행실험,류식세포의감정MSCs표면표지.BMSCs결양배양0h(대조조)、12h、24h화48h후,RT-PCR검측SDF-1화VEGF기인표체,ELISA법검측세포상청액중SDF-1화VEGF단백함량.HUVECs전대배양후분성삼조진행실험:대조조、BMSCsCMN-HUVECs조,BMSCsCMH-HUVECs조,MTT검측삼조세포증식능력,체외혈관형성실험분석삼조세포재Matrigel상관강양결구형성정황.결과 (1) BMSCs정선와상장사형즉섬유모세포양생장;(2) 인BMSCs양성표체CD29、CD44화CD90,이CD34、CD45화CD106위음성;(3) BMSCs결양배양후SDF-1화VEGF재mRNA화단백수평표체균교상양배양현저증고(P균<0.05);(4) BMSCsCMH명현제고HUVECs증식능력(P<0.05),현저증가HUVECs재Matrigel상형성관강양결구적능력(P<0.05).결론 인BMSCs재결양배경하통과방분비SDF-1화VEGF제고혈관내피세포증식화관강양결구형성능력,촉진혈관신생.
