CAJ | 학술논문

目的探讨脂质体介导PTEN基因转染人胆管癌细胞(QBC939),联合化疗药物奥沙利铂(L-OHP),分别进行人胆管癌细胞体外培养和体内接种生长,观察分析该基因对胆管癌细胞生长的抑制情况,探索人类胆管癌的生物治疗的可行性和方法.方法将携带PTEN基因的真核表达载体pBP-PTEN和不含该基因的空载体.转胆管癌QBC939细胞,嘌呤霉素抗性筛选克隆、扩增培养.绘制细胞生长曲线及MTT细胞活性观察;利用免疫组化检测转染前后PTEN阳性表达率;透射电镜扫描观察转染前后及联合奥沙利铂后细胞的超微结构变化;流式细胞分析细胞的周期变化和细胞凋亡情况;体外细胞侵袭力抑制试验;裸鼠体内肿瘤生长,病理学及电镜扫描的观测.结果PTEN基因转染后QBC939细胞稳定表达,阳性表达率升高(P＜0.05);肿瘤细胞活性下降(P＜0.05),细胞周期G1～S期抑制,细胞凋亡率增加(P＜0.01);透射电镜细胞较成熟、分化好;细胞侵袭力明显抑制(P＜0.05);裸鼠体内肿瘤未转染组生长早,加入奥沙利铂后生长受抑制(P＜0.05),病理证实为腺癌.结论1.脂质体成功将PTEN基因转染人胆管癌QBC939细胞,并稳定表达.2.PTEN基因转染后细胞生长速度无明显变化;MTT实验活性细胞数有所下降.3.转PTEN基因后的胆管癌细胞超微结构变化显示线粒体增多,细胞较成熟、分化好;流式细胞议分析,细胞周期G1期被抑制,细胞凋亡多,侵袭力受到抑制;4.接种转PTEN基因裸鼠的体内成瘤显著抑制;6.转基因的生物治疗联合奥沙利铂(L-OHP)对人胆管癌细胞生长具有显著的抑制作用.
목적탐토지질체개도PTEN기인전염인담관암세포(QBC939),연합화료약물오사리박(L-OHP),분별진행인담관암세포체외배양화체내접충생장,관찰분석해기인대담관암세포생장적억제정황,탐색인류담관암적생물치료적가행성화방법.방법장휴대PTEN기인적진핵표체재체pBP-PTEN화불함해기인적공재체.전담관암QBC939세포,표령매소항성사선극륭、확증배양.회제세포생장곡선급MTT세포활성관찰;이용면역조화검측전염전후PTEN양성표체솔;투사전경소묘관찰전염전후급연합오사리박후세포적초미결구변화;류식세포분석세포적주기변화화세포조망정황;체외세포침습력억제시험;라서체내종류생장,병이학급전경소묘적관측.결과PTEN기인전염후QBC939세포은정표체,양성표체솔승고(P＜0.05);종류세포활성하강(P＜0.05),세포주기G1～S기억제,세포조망솔증가(P＜0.01);투사전경세포교성숙、분화호;세포침습력명현억제(P＜0.05);라서체내종류미전염조생장조,가입오사리박후생장수억제(P＜0.05),병리증실위선암.결론1.지질체성공장PTEN기인전염인담관암QBC939세포,병은정표체.2.PTEN기인전염후세포생장속도무명현변화;MTT실험활성세포수유소하강.3.전PTEN기인후적담관암세포초미결구변화현시선립체증다,세포교성숙、분화호;류식세포의분석,세포주기G1기피억제,세포조망다,침습력수도억제;4.접충전PTEN기인라서적체내성류현저억제;6.전기인적생물치료연합오사리박(L-OHP)대인담관암세포생장구유현저적억제작용.