中华创伤骨科杂志
中華創傷骨科雜誌
중화창상골과잡지
CHINESE JOURNAL OF ORTHOPAEDIC TRAUMA
2007年
2期
157-161
,共5页
赵其纯%蔡道章%王其友%刘斌%陈竹生
趙其純%蔡道章%王其友%劉斌%陳竹生
조기순%채도장%왕기우%류빈%진죽생
组织工程%骨髓基质于细胞%聚羟基烷酸酯%生物相容性%软骨
組織工程%骨髓基質于細胞%聚羥基烷痠酯%生物相容性%軟骨
조직공정%골수기질우세포%취간기완산지%생물상용성%연골
目的 评价聚羟基烷酸酯(PHBV)作为组织工程支架与绵羊骨髓基质干细胞(BMSCs)的生物相容性.方法 原代培养绵羊BMSCs,传至2～3代后,接种至PHBV膜和泡沫样三维支架上,光镜和扫描电镜观察细胞形态,计数1、2、6 h时的细胞黏附率;并以接种至培养板上细胞为对照组,每日细胞计数,绘制生长曲线;按培养液量与支架体积10 mL/cm3为标准浓度制备浸提液,并制备标准浓度1/16～16倍的浸提液,以MTT法检测细胞毒性;流式细胞仪分析接种到材料上的细胞周期,计算增殖指数;BMSCs接种于PHBV三维支架上4、8、12 d,以Hoechst33258荧光法定量测定细胞内DNA含量,BCA法测定蛋白质含量.结果 第3代BMSCs接种至PHBV膜上2 h后即大部黏附,黏附率75.6%,与对照组相比差异无统计学意义,绘制生长曲线见细胞生长与对照组无差异;MTT法检测见9个浓度梯度的浸提液毒性均为0级;光镜和扫描电镜观察见细胞接种于PHBV膜上2 h后大部分黏附,3 d后伸展良好,呈纺锤形或梭形,在三维支架的孔隙内立体生长,1周开始细胞间连接,3周广泛连接,分泌大量基质;流式细胞分析见接种于材料上的细胞周期无变化;接种至PHBV三维支架上的细胞内DNA、蛋白质浓度与对照组比较无差异.结论 PHBV作为BMSCs的组织工程支架材料,具有良好的生物相容性.
目的 評價聚羥基烷痠酯(PHBV)作為組織工程支架與綿羊骨髓基質榦細胞(BMSCs)的生物相容性.方法 原代培養綿羊BMSCs,傳至2～3代後,接種至PHBV膜和泡沫樣三維支架上,光鏡和掃描電鏡觀察細胞形態,計數1、2、6 h時的細胞黏附率;併以接種至培養闆上細胞為對照組,每日細胞計數,繪製生長麯線;按培養液量與支架體積10 mL/cm3為標準濃度製備浸提液,併製備標準濃度1/16～16倍的浸提液,以MTT法檢測細胞毒性;流式細胞儀分析接種到材料上的細胞週期,計算增殖指數;BMSCs接種于PHBV三維支架上4、8、12 d,以Hoechst33258熒光法定量測定細胞內DNA含量,BCA法測定蛋白質含量.結果 第3代BMSCs接種至PHBV膜上2 h後即大部黏附,黏附率75.6%,與對照組相比差異無統計學意義,繪製生長麯線見細胞生長與對照組無差異;MTT法檢測見9箇濃度梯度的浸提液毒性均為0級;光鏡和掃描電鏡觀察見細胞接種于PHBV膜上2 h後大部分黏附,3 d後伸展良好,呈紡錘形或梭形,在三維支架的孔隙內立體生長,1週開始細胞間連接,3週廣汎連接,分泌大量基質;流式細胞分析見接種于材料上的細胞週期無變化;接種至PHBV三維支架上的細胞內DNA、蛋白質濃度與對照組比較無差異.結論 PHBV作為BMSCs的組織工程支架材料,具有良好的生物相容性.
목적 평개취간기완산지(PHBV)작위조직공정지가여면양골수기질간세포(BMSCs)적생물상용성.방법 원대배양면양BMSCs,전지2～3대후,접충지PHBV막화포말양삼유지가상,광경화소묘전경관찰세포형태,계수1、2、6 h시적세포점부솔;병이접충지배양판상세포위대조조,매일세포계수,회제생장곡선;안배양액량여지가체적10 mL/cm3위표준농도제비침제액,병제비표준농도1/16～16배적침제액,이MTT법검측세포독성;류식세포의분석접충도재료상적세포주기,계산증식지수;BMSCs접충우PHBV삼유지가상4、8、12 d,이Hoechst33258형광법정량측정세포내DNA함량,BCA법측정단백질함량.결과 제3대BMSCs접충지PHBV막상2 h후즉대부점부,점부솔75.6%,여대조조상비차이무통계학의의,회제생장곡선견세포생장여대조조무차이;MTT법검측견9개농도제도적침제액독성균위0급;광경화소묘전경관찰견세포접충우PHBV막상2 h후대부분점부,3 d후신전량호,정방추형혹사형,재삼유지가적공극내입체생장,1주개시세포간련접,3주엄범련접,분비대량기질;류식세포분석견접충우재료상적세포주기무변화;접충지PHBV삼유지가상적세포내DNA、단백질농도여대조조비교무차이.결론 PHBV작위BMSCs적조직공정지가재료,구유량호적생물상용성.
