中华微生物学和免疫学杂志
中華微生物學和免疫學雜誌
중화미생물학화면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
2004年
2期
155-158
,共4页
陈唯军%牛东升%张雪颖%陈梅玲%温博海%陈香蕊
陳唯軍%牛東升%張雪穎%陳梅玲%溫博海%陳香蕊
진유군%우동승%장설영%진매령%온박해%진향예
恙虫病东方体%蛋白基因%克隆表达%免疫印迹%ELISA
恙蟲病東方體%蛋白基因%剋隆錶達%免疫印跡%ELISA
양충병동방체%단백기인%극륭표체%면역인적%ELISA
目的构建含Orientia tsutsugamushi Sxh951株(Ot. Sxh951)相对分子质量(Mr)为56×103外膜蛋白基因(sxh56)的重组质粒pQE30/56,表达Mr 56×103蛋白并观察其在ELISA中的应用. 方法 IPTG诱导sxh56重组质粒;观察SDS-PAGE和免疫印迹结果;经Ni-NTA亲和层析纯化后的重组蛋白分别与Ot. Gilliam、Ot. Karp、Ot. Kato感染鼠血清进行ELISA和免疫印迹检测. 结果 SDS-PAGE和免疫印迹检测显示有一Mr约为56×103的特异蛋白带;ELISA和免疫印迹结果显示该重组蛋白只与Ot. Gilliam感染鼠血清呈阳性反应;重组蛋白用作ELISA包被抗原检测小鼠血清抗体IgG,特异性为100%,敏感性96.67%;检测人血清抗体IgG的敏感性为88.08%,特异性96.36%. 结论表达的重组Sxh56蛋白具有良好的免疫反应性;其作为ELISA包被抗原,具有良好的特异性和敏感性.
目的構建含Orientia tsutsugamushi Sxh951株(Ot. Sxh951)相對分子質量(Mr)為56×103外膜蛋白基因(sxh56)的重組質粒pQE30/56,錶達Mr 56×103蛋白併觀察其在ELISA中的應用. 方法 IPTG誘導sxh56重組質粒;觀察SDS-PAGE和免疫印跡結果;經Ni-NTA親和層析純化後的重組蛋白分彆與Ot. Gilliam、Ot. Karp、Ot. Kato感染鼠血清進行ELISA和免疫印跡檢測. 結果 SDS-PAGE和免疫印跡檢測顯示有一Mr約為56×103的特異蛋白帶;ELISA和免疫印跡結果顯示該重組蛋白隻與Ot. Gilliam感染鼠血清呈暘性反應;重組蛋白用作ELISA包被抗原檢測小鼠血清抗體IgG,特異性為100%,敏感性96.67%;檢測人血清抗體IgG的敏感性為88.08%,特異性96.36%. 結論錶達的重組Sxh56蛋白具有良好的免疫反應性;其作為ELISA包被抗原,具有良好的特異性和敏感性.
목적구건함Orientia tsutsugamushi Sxh951주(Ot. Sxh951)상대분자질량(Mr)위56×103외막단백기인(sxh56)적중조질립pQE30/56,표체Mr 56×103단백병관찰기재ELISA중적응용. 방법 IPTG유도sxh56중조질립;관찰SDS-PAGE화면역인적결과;경Ni-NTA친화층석순화후적중조단백분별여Ot. Gilliam、Ot. Karp、Ot. Kato감염서혈청진행ELISA화면역인적검측. 결과 SDS-PAGE화면역인적검측현시유일Mr약위56×103적특이단백대;ELISA화면역인적결과현시해중조단백지여Ot. Gilliam감염서혈청정양성반응;중조단백용작ELISA포피항원검측소서혈청항체IgG,특이성위100%,민감성96.67%;검측인혈청항체IgG적민감성위88.08%,특이성96.36%. 결론표체적중조Sxh56단백구유량호적면역반응성;기작위ELISA포피항원,구유량호적특이성화민감성.
