药物生物技术
藥物生物技術
약물생물기술
PHARMACEUTICAL BIOTECHNOLOGY
2000年
3期
129-131
,共3页
梅柱中%岳军明%张茂林%乔贵林%殷震
梅柱中%嶽軍明%張茂林%喬貴林%慇震
매주중%악군명%장무림%교귀림%은진
人促红细胞生成素%真核表达%CHO-dhfr-细胞
人促紅細胞生成素%真覈錶達%CHO-dhfr-細胞
인촉홍세포생성소%진핵표체%CHO-dhfr-세포
为了获得人促红细胞生成素(EPO)的高效表达,以EPO gDNA 为基础构建了两个真核表达载体pDE、pCE,将它们分别经脂质体转染CHO-dhfr-细胞,其48h瞬时表达量分别为27.5ng/ml与88.90ng/ml.然后用氨甲喋呤(MTX)对转染细胞进行加压并挑选细胞克隆,共获得3株高效表达EPO的工程细胞株A,B,C,其中A来自质粒pCE,B和C来自pDE,在2×10-6mol/L的MTX的压力下,它们48h的最高表达水平分别为A:8.7μg/ml,B:10.76μg/ml,C:16.44μg/ml.经网织红细胞法测得它们均具有体内生物活性.
為瞭穫得人促紅細胞生成素(EPO)的高效錶達,以EPO gDNA 為基礎構建瞭兩箇真覈錶達載體pDE、pCE,將它們分彆經脂質體轉染CHO-dhfr-細胞,其48h瞬時錶達量分彆為27.5ng/ml與88.90ng/ml.然後用氨甲喋呤(MTX)對轉染細胞進行加壓併挑選細胞剋隆,共穫得3株高效錶達EPO的工程細胞株A,B,C,其中A來自質粒pCE,B和C來自pDE,在2×10-6mol/L的MTX的壓力下,它們48h的最高錶達水平分彆為A:8.7μg/ml,B:10.76μg/ml,C:16.44μg/ml.經網織紅細胞法測得它們均具有體內生物活性.
위료획득인촉홍세포생성소(EPO)적고효표체,이EPO gDNA 위기출구건료량개진핵표체재체pDE、pCE,장타문분별경지질체전염CHO-dhfr-세포,기48h순시표체량분별위27.5ng/ml여88.90ng/ml.연후용안갑첩령(MTX)대전염세포진행가압병도선세포극륭,공획득3주고효표체EPO적공정세포주A,B,C,기중A래자질립pCE,B화C래자pDE,재2×10-6mol/L적MTX적압력하,타문48h적최고표체수평분별위A:8.7μg/ml,B:10.76μg/ml,C:16.44μg/ml.경망직홍세포법측득타문균구유체내생물활성.
