军事医学科学院院刊
軍事醫學科學院院刊
군사의학과학원원간
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2005年
6期
520-522
,共3页
何华庆%刘云%刘礼兵%林维平%李思光%徐琪寿
何華慶%劉雲%劉禮兵%林維平%李思光%徐琪壽
하화경%류운%류례병%림유평%리사광%서기수
aroE 基因%大肠杆菌%基因表达%奎尼酸脱氢酶%聚合酶链反应
aroE 基因%大腸桿菌%基因錶達%奎尼痠脫氫酶%聚閤酶鏈反應
aroE 기인%대장간균%기인표체%규니산탈경매%취합매련반응
目的: 克隆表达大肠杆菌莽草酸脱氢酶基因aroE,并测定其生物学活性.方法: 根据大肠杆菌中aroE基因的序列设计了一对引物,利用PCR 技术扩增得到aroE基因,将其克隆入高效原核表达载体pBV220,以双脱氧法进行测序,然后对该重组子利用温度诱导表达,并测酶的生物活性.结果: 构建了aroE基因的克隆和表达重组子, aroE基因获得高效表达,SDS-PAGE 图谱显示新增30×103 蛋白带,酶活性测定结果表明奎尼酸脱氢酶的相对酶活性是5.6倍.结论: 实现了莽草酸脱氢酶基因在大肠杆菌中的高效表达,证明了其具有奎尼酸脱氢酶活性,为构建产奎尼酸工程菌种奠定了基础.
目的: 剋隆錶達大腸桿菌莽草痠脫氫酶基因aroE,併測定其生物學活性.方法: 根據大腸桿菌中aroE基因的序列設計瞭一對引物,利用PCR 技術擴增得到aroE基因,將其剋隆入高效原覈錶達載體pBV220,以雙脫氧法進行測序,然後對該重組子利用溫度誘導錶達,併測酶的生物活性.結果: 構建瞭aroE基因的剋隆和錶達重組子, aroE基因穫得高效錶達,SDS-PAGE 圖譜顯示新增30×103 蛋白帶,酶活性測定結果錶明奎尼痠脫氫酶的相對酶活性是5.6倍.結論: 實現瞭莽草痠脫氫酶基因在大腸桿菌中的高效錶達,證明瞭其具有奎尼痠脫氫酶活性,為構建產奎尼痠工程菌種奠定瞭基礎.
목적: 극륭표체대장간균망초산탈경매기인aroE,병측정기생물학활성.방법: 근거대장간균중aroE기인적서렬설계료일대인물,이용PCR 기술확증득도aroE기인,장기극륭입고효원핵표체재체pBV220,이쌍탈양법진행측서,연후대해중조자이용온도유도표체,병측매적생물활성.결과: 구건료aroE기인적극륭화표체중조자, aroE기인획득고효표체,SDS-PAGE 도보현시신증30×103 단백대,매활성측정결과표명규니산탈경매적상대매활성시5.6배.결론: 실현료망초산탈경매기인재대장간균중적고효표체,증명료기구유규니산탈경매활성,위구건산규니산공정균충전정료기출.
