中国艾滋病性病
中國艾滋病性病
중국애자병성병
CHINESE JOURNAL OF AIDS & STD
2006年
2期
157-160
,共4页
陆原%陈达灿%何敬远%禤国维
陸原%陳達燦%何敬遠%禤國維
륙원%진체찬%하경원%훤국유
梅毒%嵌合优势表位抗原%双抗原夹心法
梅毒%嵌閤優勢錶位抗原%雙抗原夾心法
매독%감합우세표위항원%쌍항원협심법
目的用基因工程方法表达嵌合的梅毒螺旋体优势表位抗原,建立检测血清梅毒抗体的双抗原夹心酶联免疫方法(double antigen sandwich enzyme-linked immunosorbent assay,DAS-EIA).方法通过计算机软件分析选择梅毒螺旋体优势抗原表位,用聚合酶链式反应(PCR)扩增优势表位基因,构建了梅毒螺旋体多优势表位嵌合抗原(rTpN15-TpN17-TpN47)表达载体,转化宿主菌BL21(DE3)进行表达,亲和层析柱法纯化获得高纯度融合抗原,并用其建立检测梅毒抗体的DAS-EIA.结果表达的优势表位嵌合抗原具有很好的抗原性.用其建立的嵌合抗原DAS-EIA检测确诊的50份阳性和30份阴性血,阳性检出率和阴性检出率都是100%.结论嵌合抗原DAS-EIA法具有比间接EIA和重组单抗原DAS-EIA更高的灵敏度和检出正确率,其检测水平已经达到国外TPHA的水平.该方法的建立为临床检测梅毒开辟了新的方法.
目的用基因工程方法錶達嵌閤的梅毒螺鏇體優勢錶位抗原,建立檢測血清梅毒抗體的雙抗原夾心酶聯免疫方法(double antigen sandwich enzyme-linked immunosorbent assay,DAS-EIA).方法通過計算機軟件分析選擇梅毒螺鏇體優勢抗原錶位,用聚閤酶鏈式反應(PCR)擴增優勢錶位基因,構建瞭梅毒螺鏇體多優勢錶位嵌閤抗原(rTpN15-TpN17-TpN47)錶達載體,轉化宿主菌BL21(DE3)進行錶達,親和層析柱法純化穫得高純度融閤抗原,併用其建立檢測梅毒抗體的DAS-EIA.結果錶達的優勢錶位嵌閤抗原具有很好的抗原性.用其建立的嵌閤抗原DAS-EIA檢測確診的50份暘性和30份陰性血,暘性檢齣率和陰性檢齣率都是100%.結論嵌閤抗原DAS-EIA法具有比間接EIA和重組單抗原DAS-EIA更高的靈敏度和檢齣正確率,其檢測水平已經達到國外TPHA的水平.該方法的建立為臨床檢測梅毒開闢瞭新的方法.
목적용기인공정방법표체감합적매독라선체우세표위항원,건립검측혈청매독항체적쌍항원협심매련면역방법(double antigen sandwich enzyme-linked immunosorbent assay,DAS-EIA).방법통과계산궤연건분석선택매독라선체우세항원표위,용취합매련식반응(PCR)확증우세표위기인,구건료매독라선체다우세표위감합항원(rTpN15-TpN17-TpN47)표체재체,전화숙주균BL21(DE3)진행표체,친화층석주법순화획득고순도융합항원,병용기건립검측매독항체적DAS-EIA.결과표체적우세표위감합항원구유흔호적항원성.용기건립적감합항원DAS-EIA검측학진적50빈양성화30빈음성혈,양성검출솔화음성검출솔도시100%.결론감합항원DAS-EIA법구유비간접EIA화중조단항원DAS-EIA경고적령민도화검출정학솔,기검측수평이경체도국외TPHA적수평.해방법적건립위림상검측매독개벽료신적방법.
