东北农业大学学报
東北農業大學學報
동북농업대학학보
JOURNAL OF NORTHEAST AGRICULTURAL UNIVERSITY
2006年
5期
656-661
,共6页
何海娟%王君伟%李昭春%杨玉菊%杨志
何海娟%王君偉%李昭春%楊玉菊%楊誌
하해연%왕군위%리소춘%양옥국%양지
牛粘膜病病毒%E1基因%克隆%序列分析%原核表达
牛粘膜病病毒%E1基因%剋隆%序列分析%原覈錶達
우점막병병독%E1기인%극륭%서렬분석%원핵표체
参考BVDVVEDEVAC株的基因组序列及E2基因的测序结果设计一对引物,扩增出预期585 bp的目的片段.扩增产物克隆至pMD18-T载体,经酶切鉴定获得阳性重组质粒并对其进行测序.测序结果与参考序列VEDE-VAC株比较,二者的核苷酸同源性为100%,推导氨基酸同源性为100%.测序结果经同源性比较,克隆得到的基因与VEDEVAC株同源性最高.系统发生树分析推测E1基因与VEDEVAC株在进化上此较接近.将E1基因定向亚克隆到表达载体pGEX-6p-1中,对阳性重组质粒转化的大肠杆菌BL21进行诱导,E1基因获得了成功表达.
參攷BVDVVEDEVAC株的基因組序列及E2基因的測序結果設計一對引物,擴增齣預期585 bp的目的片段.擴增產物剋隆至pMD18-T載體,經酶切鑒定穫得暘性重組質粒併對其進行測序.測序結果與參攷序列VEDE-VAC株比較,二者的覈苷痠同源性為100%,推導氨基痠同源性為100%.測序結果經同源性比較,剋隆得到的基因與VEDEVAC株同源性最高.繫統髮生樹分析推測E1基因與VEDEVAC株在進化上此較接近.將E1基因定嚮亞剋隆到錶達載體pGEX-6p-1中,對暘性重組質粒轉化的大腸桿菌BL21進行誘導,E1基因穫得瞭成功錶達.
삼고BVDVVEDEVAC주적기인조서렬급E2기인적측서결과설계일대인물,확증출예기585 bp적목적편단.확증산물극륭지pMD18-T재체,경매절감정획득양성중조질립병대기진행측서.측서결과여삼고서렬VEDE-VAC주비교,이자적핵감산동원성위100%,추도안기산동원성위100%.측서결과경동원성비교,극륭득도적기인여VEDEVAC주동원성최고.계통발생수분석추측E1기인여VEDEVAC주재진화상차교접근.장E1기인정향아극륭도표체재체pGEX-6p-1중,대양성중조질립전화적대장간균BL21진행유도,E1기인획득료성공표체.
