河北医科大学学报
河北醫科大學學報
하북의과대학학보
JOURNAL OF HEBEI MEDICAL UNIVERSITY
2008年
4期
491-494
,共4页
张俊仙%吴雪琼%邢婉丽%梁艳%阳幼荣%李洪敏
張俊仙%吳雪瓊%邢婉麗%樑豔%暘幼榮%李洪敏
장준선%오설경%형완려%량염%양유영%리홍민
分枝杆菌,结核%异烟肼%药物耐受性
分枝桿菌,結覈%異煙肼%藥物耐受性
분지간균,결핵%이연정%약물내수성
目的 研制一种新型DNA芯片,用于快速检测结核分枝杆菌耐异烟肼katG基因突变.方法 根据结核分枝杆菌katG基因序列设计探针并制作DNA芯片,用四甲基罗丹明标记的引物扩增结核分枝杆菌katG基因突变热点的片断,与DNA芯片杂交,同时以聚合酶链反应一单链构象多态性(pdymerase chain reaction-single stranded conformation polymorphism,PCR-SSCP)和DNA测序法为对照.结果 153株结核分枝杆菌临床分离株中30株异烟肼敏感株的PCR-SSCP和DNA芯片杂交结果与结核分枝杆菌标准株完全相同, 123株异烟肼耐药株中有85株检测到katG基因突变,占69.1%(85/123).其中83株为31,5位密码子AGC→ACC突变,2株为315位密码子AGC→AAC突变,该突变与PCR-SSCP和DNA芯片杂交结果一致;余38株未检测到突变,经测序证实其中1株PCR-SSCP有不同突变的为279位密码子GGC→GAC突变,因芯片上未点该位点的探针,所以杂交结果为阴性.结论 用DNA芯片可快速、特异地检测出大多数结核分枝杆菌耐异烟肼分离株的katG基因突变,可用于临床耐药性的检测,指导临床用药.
目的 研製一種新型DNA芯片,用于快速檢測結覈分枝桿菌耐異煙肼katG基因突變.方法 根據結覈分枝桿菌katG基因序列設計探針併製作DNA芯片,用四甲基囉丹明標記的引物擴增結覈分枝桿菌katG基因突變熱點的片斷,與DNA芯片雜交,同時以聚閤酶鏈反應一單鏈構象多態性(pdymerase chain reaction-single stranded conformation polymorphism,PCR-SSCP)和DNA測序法為對照.結果 153株結覈分枝桿菌臨床分離株中30株異煙肼敏感株的PCR-SSCP和DNA芯片雜交結果與結覈分枝桿菌標準株完全相同, 123株異煙肼耐藥株中有85株檢測到katG基因突變,佔69.1%(85/123).其中83株為31,5位密碼子AGC→ACC突變,2株為315位密碼子AGC→AAC突變,該突變與PCR-SSCP和DNA芯片雜交結果一緻;餘38株未檢測到突變,經測序證實其中1株PCR-SSCP有不同突變的為279位密碼子GGC→GAC突變,因芯片上未點該位點的探針,所以雜交結果為陰性.結論 用DNA芯片可快速、特異地檢測齣大多數結覈分枝桿菌耐異煙肼分離株的katG基因突變,可用于臨床耐藥性的檢測,指導臨床用藥.
목적 연제일충신형DNA심편,용우쾌속검측결핵분지간균내이연정katG기인돌변.방법 근거결핵분지간균katG기인서렬설계탐침병제작DNA심편,용사갑기라단명표기적인물확증결핵분지간균katG기인돌변열점적편단,여DNA심편잡교,동시이취합매련반응일단련구상다태성(pdymerase chain reaction-single stranded conformation polymorphism,PCR-SSCP)화DNA측서법위대조.결과 153주결핵분지간균림상분리주중30주이연정민감주적PCR-SSCP화DNA심편잡교결과여결핵분지간균표준주완전상동, 123주이연정내약주중유85주검측도katG기인돌변,점69.1%(85/123).기중83주위31,5위밀마자AGC→ACC돌변,2주위315위밀마자AGC→AAC돌변,해돌변여PCR-SSCP화DNA심편잡교결과일치;여38주미검측도돌변,경측서증실기중1주PCR-SSCP유불동돌변적위279위밀마자GGC→GAC돌변,인심편상미점해위점적탐침,소이잡교결과위음성.결론 용DNA심편가쾌속、특이지검측출대다수결핵분지간균내이연정분리주적katG기인돌변,가용우림상내약성적검측,지도림상용약.
