生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2009年
3期
343-345
,共3页
付宁%赵莉霞%朱恒奇%周晓巍%马学恩%黄培堂
付寧%趙莉霞%硃恆奇%週曉巍%馬學恩%黃培堂
부저%조리하%주항기%주효외%마학은%황배당
Gas8%抗体%亲和纯化%组织表达谱
Gas8%抗體%親和純化%組織錶達譜
Gas8%항체%친화순화%조직표체보
目的:制备Gas8抗体,并检测小鼠各组织中Gas8表达谱.方法:在大肠杆菌BL21(DE3)中表达His标签标记的Gas8融合蛋白,以纯化的Gas8重组融合蛋白为抗原制备兔Gas8多抗血清,进一步利用亲和纯化方法制备Gas8多克隆抗体;为确定Gas8抗体的特异性,通过免疫印迹方法检测瞬时表达的Flag-Gas8融合蛋白,同时以抗Flag单克隆抗体作为对照;利用制备的抗体通过Western blot检测Gas8在小鼠各组织中的表达谱.结果:与Gas8特异性结合的抗体能够通过免疫法获得;利用制备的抗体检测到Gas8在小鼠心、肺、肾、脑、肝、脾、肌肉、睾丸各组织中均表达.结论:获得了特异性抗Gas8抗体,用该抗体可以检测到小鼠组织中Gas8的表达.
目的:製備Gas8抗體,併檢測小鼠各組織中Gas8錶達譜.方法:在大腸桿菌BL21(DE3)中錶達His標籤標記的Gas8融閤蛋白,以純化的Gas8重組融閤蛋白為抗原製備兔Gas8多抗血清,進一步利用親和純化方法製備Gas8多剋隆抗體;為確定Gas8抗體的特異性,通過免疫印跡方法檢測瞬時錶達的Flag-Gas8融閤蛋白,同時以抗Flag單剋隆抗體作為對照;利用製備的抗體通過Western blot檢測Gas8在小鼠各組織中的錶達譜.結果:與Gas8特異性結閤的抗體能夠通過免疫法穫得;利用製備的抗體檢測到Gas8在小鼠心、肺、腎、腦、肝、脾、肌肉、睪汍各組織中均錶達.結論:穫得瞭特異性抗Gas8抗體,用該抗體可以檢測到小鼠組織中Gas8的錶達.
목적:제비Gas8항체,병검측소서각조직중Gas8표체보.방법:재대장간균BL21(DE3)중표체His표첨표기적Gas8융합단백,이순화적Gas8중조융합단백위항원제비토Gas8다항혈청,진일보이용친화순화방법제비Gas8다극륭항체;위학정Gas8항체적특이성,통과면역인적방법검측순시표체적Flag-Gas8융합단백,동시이항Flag단극륭항체작위대조;이용제비적항체통과Western blot검측Gas8재소서각조직중적표체보.결과:여Gas8특이성결합적항체능구통과면역법획득;이용제비적항체검측도Gas8재소서심、폐、신、뇌、간、비、기육、고환각조직중균표체.결론:획득료특이성항Gas8항체,용해항체가이검측도소서조직중Gas8적표체.
