南华大学学报(医学版)
南華大學學報(醫學版)
남화대학학보(의학판)
JOURNAL OF NANHUA UNIVERSITY(MEDICAL EDITION)
2009年
4期
386-389
,共4页
刘厂辉%曾艳辉%唐海林%罗怡军%陈代钦
劉廠輝%曾豔輝%唐海林%囉怡軍%陳代欽
류엄휘%증염휘%당해림%라이군%진대흠
过氧化物酶体增殖物激活受体%脂肪分化相关蛋白%脂蛋白脂酶%基因转染
過氧化物酶體增殖物激活受體%脂肪分化相關蛋白%脂蛋白脂酶%基因轉染
과양화물매체증식물격활수체%지방분화상관단백%지단백지매%기인전염
目的 观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)基因转染对兔骨髓间充质干细胞(MSCs)向脂肪细胞分化的影响,探讨PPARγ在脂肪细胞早期分化中可能的调控机制. 方法 原代培养新西兰大白兔MSCs,应用脂质体介导法将pEGFP-N1-PPARγ表达载体转入MSCs中,G418筛选.分成不诱导组、空转染诱导组及转染诱导组以成脂诱导剂诱导分化,每日观察细胞形态学变化,镜下计数并计算脂肪细胞分化率,采用RT-PCR方法检测脂肪分化相关蛋白(ADRP)、脂蛋白脂酶(LPL)mRNA表达,Western blot检测ADRP、LPL蛋白表达. 结果 不诱导组细胞内没有脂滴出现,空转染诱导组和转染诱导组部分细胞成功分化为脂肪细胞,转染诱导组分化率明显高于空转染诱导组(P<0.05);不诱导组ADRP、LPLmRNA及蛋白均不表达,转染诱导组ADRP、LPLmRNA及蛋白表达水平显著高于空转染诱导组(P<0.05). 结论 PPARγ基因转染MSCs可促进其向脂肪细胞分化,增强其分化能力,可能与促进ADRP、LPL基因和蛋白的表达有关.
目的 觀察過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)基因轉染對兔骨髓間充質榦細胞(MSCs)嚮脂肪細胞分化的影響,探討PPARγ在脂肪細胞早期分化中可能的調控機製. 方法 原代培養新西蘭大白兔MSCs,應用脂質體介導法將pEGFP-N1-PPARγ錶達載體轉入MSCs中,G418篩選.分成不誘導組、空轉染誘導組及轉染誘導組以成脂誘導劑誘導分化,每日觀察細胞形態學變化,鏡下計數併計算脂肪細胞分化率,採用RT-PCR方法檢測脂肪分化相關蛋白(ADRP)、脂蛋白脂酶(LPL)mRNA錶達,Western blot檢測ADRP、LPL蛋白錶達. 結果 不誘導組細胞內沒有脂滴齣現,空轉染誘導組和轉染誘導組部分細胞成功分化為脂肪細胞,轉染誘導組分化率明顯高于空轉染誘導組(P<0.05);不誘導組ADRP、LPLmRNA及蛋白均不錶達,轉染誘導組ADRP、LPLmRNA及蛋白錶達水平顯著高于空轉染誘導組(P<0.05). 結論 PPARγ基因轉染MSCs可促進其嚮脂肪細胞分化,增彊其分化能力,可能與促進ADRP、LPL基因和蛋白的錶達有關.
목적 관찰과양화물매체증식물격활수체γ(PPARγ)기인전염대토골수간충질간세포(MSCs)향지방세포분화적영향,탐토PPARγ재지방세포조기분화중가능적조공궤제. 방법 원대배양신서란대백토MSCs,응용지질체개도법장pEGFP-N1-PPARγ표체재체전입MSCs중,G418사선.분성불유도조、공전염유도조급전염유도조이성지유도제유도분화,매일관찰세포형태학변화,경하계수병계산지방세포분화솔,채용RT-PCR방법검측지방분화상관단백(ADRP)、지단백지매(LPL)mRNA표체,Western blot검측ADRP、LPL단백표체. 결과 불유도조세포내몰유지적출현,공전염유도조화전염유도조부분세포성공분화위지방세포,전염유도조분화솔명현고우공전염유도조(P<0.05);불유도조ADRP、LPLmRNA급단백균불표체,전염유도조ADRP、LPLmRNA급단백표체수평현저고우공전염유도조(P<0.05). 결론 PPARγ기인전염MSCs가촉진기향지방세포분화,증강기분화능력,가능여촉진ADRP、LPL기인화단백적표체유관.